[发明专利]一种利用玉米黑粉菌热击蛋白启动子进行球孢白僵菌遗传转化方法在审
| 申请号： | 201410353304.6 | 申请日： | 2014-07-23 |
| 公开（公告）号： | CN104131029A | 公开（公告）日： | 2014-11-05 |
| 发明（设计）人： | 张正坤;李启云;张佳诗;路杨;徐文静;郑岩;杜茜;隋丽;任金平;田志来 | 申请（专利权）人： | 吉林省农业科学院 |
| 主分类号： | C12N15/80 | 分类号： | C12N15/80;C12N15/66 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 130000 吉林省*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种利用玉米黑粉菌热击蛋白启动子进行球孢白僵菌遗传转化方法，通过将来源于玉米黑粉菌热击蛋白启动子hsp70构建到以抗草胺磷基因bar为筛选标记、绿色荧光蛋白GFP为标记基因、TtrpC为终止子的遗传转化载体上，得到hsp70质粒；利用PEG法将步骤(1)中构建的hsp70-F质粒转入球孢白僵菌原生质体后均匀涂在带有PPT抗性的查氏培养基上，恒温培养。本发明应用来源于玉米黑粉菌热激蛋白启动子hsp70介导球孢白僵菌遗传转化，其转化效率较常用的PgpdA启动子高出近60％，该转化过程并没有影响转化子的生物学特性及杀虫毒力。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 利用 玉米 黑粉菌热击 蛋白 启动子 进行 球孢白僵菌 遗传 转化 方法 | ||
【主权项】：
一种利用玉米黑粉菌热击蛋白启动子进行球孢白僵菌遗传转化方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将来源于玉米黑粉菌热击蛋白启动子hsp70构建到以抗草胺磷基因bar为筛选标记、绿色荧光蛋白GFP为标记基因、TtrpC为终止子的遗传转化载体上，得到hsp70质粒；(2)利用PEG法将步骤(1)中构建的hsp70‑F质粒转入球孢白僵菌原生质体后均匀涂在带有PPT抗性的查氏培养基上，恒温培养。
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