[发明专利]从聚硒植物碎米荠中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法

摘要

本发明涉及一种从聚硒植物碎米荠中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法。将干燥的聚硒植物碎米荠原料粉碎后，通过加入盐酸提取硒代胱氨酸，加入氢氧化钠提取硒代蛋氨酸，滤液调节pH值到近中性后，采用高压制备柱进行分离，含硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的洗脱液分别用纤维素脂透析袋透去无机盐离子，再通过冷冻干燥得到硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸精品。该技术工艺简单，产品提取率高，生产的产品可作原料药生产注射液或食品添加剂，用途广泛，同时可以带动碎米荠种植产业的发展，使产业链得以延伸。

主权项

一种从聚硒植物碎米荠中提取硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸的方法，其特征在于具体步骤如下：a.碎米荠原料预处理：将聚硒碎米荠植株晒干、粉碎，过40目筛；b.硒代胱氨酸的提取和分离：粉碎的碎米荠用水或0.1‑6mol/L的盐酸或0.1‑6mol/L的NaOH溶液，在60℃‑120℃下超声提取或震荡60min‑180min提取，过滤，将残渣重复提取2次，合并滤液，将溶液pH值调节到6‑8；c.硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸分离条件的确定：以DL‑硒代胱氨酸和DL‑硒代蛋氨酸为对照品，用高效液相色谱‑原子荧光联用法HPLC‑HG‑AFS确定分离条件为阴离子交换柱或C₁₈制备色谱柱，流动相为30mM‑100mM的磷酸二氢氨水溶液pH值4‑10，采用梯度洗脱，流速0.1‑1.0mL/min，硒代胱氨酸保留时间为2.42±0.25min，硒代蛋氨酸保留时间为3.40±0.34min；d.分离：水解液进样到25‑45μm阴离子交换柱或C₁₈制备色谱柱分离，用30mM‑100mM的磷酸二氢氨水溶液pH值4‑10为洗脱液，采用中试高压制备系统，按峰收集硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸对应洗脱液，合并洗脱液；e.透析：将洗脱液装入截留分子量100‑500的纤维素酯透析袋，放入超纯水中，透去无机盐离子，透析袋内为硒代胱氨酸或硒代蛋氨酸溶液；f.冷冻干燥：将上步骤所得冷冻干燥，得硒代胱氨酸和硒代蛋氨酸精品；e.产品纯度检测：以DL‑硒代胱氨酸和DL‑硒代蛋氨酸为对照品，用高效液相色谱‑原子荧光联用法或高效液相‑电感耦合等离子质谱法测定。