[发明专利]一种豆科植物根瘤固氮共生体固氮能力的快速评估方法有效
申请号: | 201410367320.0 | 申请日: | 2014-07-29 |
公开(公告)号: | CN105296605B | 公开(公告)日: | 2019-01-25 |
发明(设计)人: | 徐明恺;邹谨;张惠文;李旭;张成刚 | 申请(专利权)人: | 中国科学院沈阳应用生态研究所 |
主分类号: | C12Q1/6841 | 分类号: | C12Q1/6841 |
代理公司: | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人: | 周秀梅;马驰 |
地址: | 110164 辽宁省*** | 国省代码: | 辽宁;21 |
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摘要: | 本发明涉及了一种豆科植物根瘤固氮共生体系固氮效率的快速评估方法。主要步骤为:一)植物‑根瘤菌转录本信息共提取;二)固氮酶表达原位检测;三)以固氮酶基因nifH的相对转录丰度来评估大豆根瘤固氮共生体的固氮能力。本发明的优势在于:(1)操作步骤简单、方便;(2)可用于田间快速、实时检测固氮水平。 | ||
搜索关键词: | 一种 豆科 植物 根瘤 固氮 共生 能力 快速 评估 方法 | ||
【主权项】:
1.一种豆科植物根瘤固氮共生体系固氮能力的快速评估方法,其特征在于,包括:一:植物‑根瘤菌转录本信息共提取:(1)设定对照组和待测组,对照组和待测组分别由一个或两个以上样本组成,分别提取各样本根瘤总RNA;(2)用分光光度计分别检测各样本中提取的总RNA,得到总RNA的浓度和质量;二:固氮酶基因转录水平原位检测:(1)分别将对各样本的mRNA反转录成cDNA;(2)分别用实时荧光定量PCR方法扩增各样本的固氮酶nifH基因和参比基因16s,并用2‑ΔΔCt方法计算待测组相对于对照组,固氮酶nifH基因的相对转录丰度;三:以固氮酶基因nifH的相对转录丰度来评估大豆根瘤固氮共生体的固氮能力。
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