[发明专利]利用基因芯片检测黄芪甲苷诱导RMMVECs基因表达谱的方法有效
| 申请号： | 201410369458.4 | 申请日： | 2014-07-30 |
| 公开（公告）号： | CN104087682A | 公开（公告）日： | 2014-10-08 |
| 发明（设计）人： | 董虹;胡格;张涛;段慧琴;姜代勋;穆祥;陈武 | 申请（专利权）人： | 北京农学院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京和信华成知识产权代理事务所(普通合伙) 11390 | 代理人： | 胡剑辉 |
| 地址： | 102200 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明提供一种利用基因芯片检测黄芪甲苷诱导RMMVECs基因表达谱的方法，包括以下步骤：(1)制备并纯化大鼠心肌膜微血管内皮细胞RMMVECs；(2)培养二代RMMVECs，将黄芪甲苷溶解于维持培养基中，浓度为10μg/ml，在37℃、5％CO2的条件下，将RMMVECs继续培养9h；等九个步骤；本发明成功培养了RMMVECs，并且利用基因芯片技术从基因表达水平充分验证了，提高微血管舒缩活动振幅的中药有效成分Ast或Ber能双向调节RMMVECs相关细胞因子的表达，维持细胞因子分泌的平衡，维持MVECs的正常生理功能，从而阻断了致病因子对微血管内皮细胞的伤害，发挥治疗疾病的作用。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 基因芯片 检测 黄芪 诱导 rmmvecs 基因 表达 方法 | ||
【主权项】：
利用基因芯片检测黄芪甲苷诱导RMMVECs基因表达谱的方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)制备并纯化大鼠心肌膜微血管内皮细胞RMMVECs； (2)培养二代RMMVECs，将黄芪甲苷溶解于维持培养基中，浓度为10μg/ml，在37℃、5％CO2的条件下，将RMMVECs继续培养9h； (3)将RMMVECs充分裂解，提取总RNA； (4)纯化、定量总RNA； (5)反转录合成First‑strand cDNA； (6)合成Second‑strand cDNA； (7)体外转录合成cRNA； (8)cRNA反转录； (9)荧光标记后进行基因芯片杂交，最后进行数据分析。
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