[发明专利]基于亚硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法在审
| 申请号： | 201410374669.7 | 申请日： | 2014-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN104152393A | 公开（公告）日： | 2014-11-19 |
| 发明（设计）人： | 周培;冯海玮;支月娥;唐冬;孙玉静;毛亮;罗艳青;卫星 | 申请（专利权）人： | 上海交通大学 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/70;C12N9/06;C12R1/19;C12R1/465 |
| 代理公司： | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人： | 王毓理;王锡麟 |
| 地址： | 200240 *** | 国省代码： | 上海;31 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明涉及基因工程技术领域的亚硝酸盐还原酶的工程菌及其实现方法，以灰略红链霉菌基因组DNA为模板，与含有酶切位点的引物进行PCR扩增依次得到编码亚硝酸盐还原酶大亚基及亚硝酸盐还原酶小亚基的核苷酸序列；然后将扩增得到的基因序列依次连接到共表达载体pETDuet‐1，最终获得重组共表达载体pETDuet‐NC‐ND；之后将该亚硝酸盐还原酶表达载体转化到大肠杆菌表达菌株。本发明针对现有技术存在的由于亚硝酸盐还原酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足，能够应用基因工程手段实现亚硝酸盐还原酶体外的大量表达合成，对于次生盐渍化土壤的快速修复乃至实现精准农业具有重大意义。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 亚硝酸盐 还原酶 工程 及其 实现 方法 | ||
【主权项】：
一种亚硝酸盐还原酶的工程菌，其特征在于，该工程菌为外源表达亚硝酸盐还原酶的大肠杆菌；所述的胞内亚硝酸盐还原酶具体为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1亚硝酸盐还原酶编码基因，由亚硝酸盐还原酶大亚基SG‐NC和亚硝酸盐还原酶小亚基SG‐ND构成，其核苷酸序列分别为2601bp和354bp，分别编码866和117个氨基酸，其中：亚硝酸盐还原酶大亚基SG‐NC的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，氨基酸序列如SEQ ID No.3所示；亚硝酸盐还原酶小亚基SG‐ND的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于上海交通大学，未经上海交通大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201410374669.7/，转载请声明来源钻瓜专利网。
