[发明专利]基于谷氨酰胺合成酶的工程菌及其实现方法在审
申请号: | 201410374683.7 | 申请日: | 2014-07-31 |
公开(公告)号: | CN104140945A | 公开(公告)日: | 2014-11-12 |
发明(设计)人: | 周培;冯海玮;孙玉静;毛亮;支月娥;唐冬;卫星;罗艳青 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/70;C12P13/14;C12R1/19;C12R1/465 |
代理公司: | 上海交达专利事务所 31201 | 代理人: | 王毓理;王锡麟 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 一种基因工程技术领域的基于谷氨酰胺合成酶的工程菌及其实现方法,以灰略红链霉菌基因组DNA为模板,与含有酶切位点的引物进行PCR扩增得到谷氨酰胺合成酶编码基因;然后将该基因插入大肠杆菌表达载体pET‐22b(+)中得到含有谷氨酰胺合成酶编码基因的重组表达载体;再将重组表达载体导入大肠杆菌表达菌株,筛选得到谷氨酰胺合成酶的工程菌。本发明针对现有技术存在的由于谷氨酰胺合成酶在生物体内多为胞内酶且表达量较低导致的应用范围和效果严重受限等不足,应用基因工程手段实现其体外的大量表达合成。 | ||
搜索关键词: | 基于 谷氨酰胺 合成 工程 及其 实现 方法 | ||
【主权项】:
一种谷氨酰胺合成酶的工程菌,其特征在于,该工程菌为外源表达谷氨酰胺合成酶的大肠杆菌;所述的胞内谷氨酰胺合成酶具体为灰略红链霉菌(Streptomyces griseorubens)JSD‐1谷氨酰胺合成酶大亚基基因SG‐GE,其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,其氨基酸序列如SEQ ID No.2所示;核苷酸序列为1377bp,编码453个氨基酸。
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