[发明专利]一种融合蛋白质、制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201410377969.0 | 申请日： | 2014-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN104164444A | 公开（公告）日： | 2014-11-26 |
| 发明（设计）人： | 邓亚光;欧阳慭;邓伟平;曾支农 | 申请（专利权）人： | 宜昌美光硅谷生命科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/63 | 分类号： | C12N15/63;C07K19/00;C07K1/22;C07K1/14;C07K14/47 |
| 代理公司： | 北京华沛德权律师事务所 11302 | 代理人： | 刘杰 |
| 地址： | 443005 湖北省宜昌市开发*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种融合蛋白质、制备方法及其应用，属于蛋白质生产，分析和应用领域。本发明通过建立钙调素融合蛋白质的分离，纯化，性能分析和利用钙调素融合蛋白质柱来分离提取和浓缩样本中的目标蛋白质和相关的生物分子，介绍了一种新的生物样本配制，前处理和提高生物检测灵敏度的技术和方法。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 融合 蛋白质 制备 方法 及其 应用 | ||
【主权项】：
一种融合蛋白质的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将完整的靶基因的cDNA片段克隆到融合蛋白的表达载体，cDNA克隆时，在完整基因的cDNA片段前，起始密码子(ATG)之后，加上Xa因子位点异亮氨酸‑谷氨酸‑甘氨酸‑精氨酸(Ile‑Glu‑Gly‑Arg)的脱氧核糖核酸序列；(2)将步骤(1)得到的含有完整目的基因的亚克隆表达载体，转型或转染到表达宿主细胞内，使之在宿主细胞内表达所需融合蛋白质，通过接种培养，获得含有完整目的基因载体的纯克隆细胞株；(3)使用步骤(2)含有完整目的基因载体的纯克隆细胞株，进行量化培养，蛋白表达处理，获得量化的，有目的融合蛋白质的宿主细胞；(4)将步骤(3)得到的宿主细胞进行裂解，获取细胞裂解液，对蛋白质进行纯化，获得分离，纯化的融合蛋白质；(5)使用因子Xa处理融合蛋白质，可获得纯化的目的基因蛋白质。
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