[发明专利]一种毛茛铁线莲组培快繁的方法

摘要

本发明提供一种毛茛铁线莲组培快繁的方法，经过获取无菌原材料、对芽进行诱导、不定芽增殖培养、生根培养及植株炼苗与移栽，最终获得毛茛铁线莲植株。本方法能快速繁殖毛茛铁线莲，育苗周期短，能快速得到毛茛铁线莲植株，成活率高达90%以上，繁殖系数高，而且不受外界条件的限制，四季皆可进行，节约育苗占地面积，可在短期内形成大量优良试管苗，可进行规模化生产。

主权项

一种毛茛铁线莲组培快繁的方法，其特征在于经过下列各步骤：（1）切取毛茛铁线莲的嫩芽，用水冲洗1h，再依次用体积浓度为75%的乙醇浸泡25～35s、用浓度为1‰的升汞浸泡5～10min，然后用无菌水冲洗3～5次后吸干表面水分，取嫩芽基部切成1cm，再接种于芽诱导培养基上：MS+6‑BA 1.5～2.5mg/L+NAA 0.4～0.6mg/L+AgNO₃ 2.5～3.5mg/L，在温度为22～26℃、光照强度为1500～2000Lx、相对湿度为65～75%的条件下进行培养；（2）待步骤（1）嫩芽的芽基部开始膨大并出现黄绿色突起时，再继续培养20～25天后出现明显的愈伤组织，然后继续培养30～35天，直至愈伤组织长出小芽；（3）切下步骤（2）带芽的愈伤组织接种于不定芽增殖培养基上：MS+BA 1.5～2.5mg/L+NAA 0.04～0.06mg/L，在温度为22～26℃、光照强度为1500～2000Lx、相对湿度为65～75%的条件下进行培养，使不定芽增殖，直至不定芽长到2～3cm；（4）取步骤（3）高为2～3cm、生长健壮的不定芽植株，将其转接入生根培养基中：1/2MS+IBA 0.4～0.6mg/L+NAA 0.9～1.1mg/L+AC 0.1～0.25g/L，在温度为22～26℃、光照强度为1500～2000Lx、相对湿度为65～75%的条件下进行诱导生根，30天后植株幼苗的基部分化出白色的根原基，直至根原基长至3～5cm，得到生根苗；（5）取步骤（４）生长健壮的生根瓶苗于室内揭开封口膜过渡3～8天，取出后洗净根部，移栽于大棚中驯化25～35天，然后再移栽至室外并给予适当肥水管理，即得到毛茛铁线莲植株。