[发明专利]一种通用弧菌电感受态细胞制备及电转化方法无效
| 申请号： | 201410390978.3 | 申请日： | 2014-08-08 |
| 公开（公告）号： | CN104195073A | 公开（公告）日： | 2014-12-10 |
| 发明（设计）人： | 罗鹏;王艳红;胡超群;夏建军 | 申请（专利权）人： | 中国科学院南海海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;C12N15/74;C12R1/63 |
| 代理公司： | 广州科粤专利商标代理有限公司 44001 | 代理人： | 刘明星 |
| 地址： | 510301 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种通用弧菌电感受态细胞制备及电转化方法。它是将弧菌接种至脑心浸液培养基中，培养至对数生长期，取菌液，离心收集菌体，菌体用洗涤缓冲液洗涤，离心收集菌体，如此用洗涤缓冲液洗涤若干次，收集的菌体重悬于洗涤缓冲液中，由此得到弧菌电感受态细胞；所述的洗涤缓冲液含有：133-266mM蔗糖、1-5mM 4-羟乙基哌嗪乙磺，溶剂为水。利用本发明的方法能够成功的获得弧菌电感受态细胞，获得的感受态细胞按照本发明的电转化方法能够成功的将质粒转入弧菌细胞中，从而实现了将各种遗传资料转入弧菌细胞中，为对弧菌致病机理的探索提供了成熟、便捷的遗传操作技术。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 通用 弧菌 感受态 细胞 制备 转化 方法 | ||
【主权项】：
一种通用弧菌电感受态细胞制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将弧菌接种至脑心浸液培养基中，培养至对数生长期，取菌液，离心收集菌体，菌体用洗涤缓冲液洗涤，离心收集菌体，如此用洗涤缓冲液洗涤若干次，收集的菌体重悬于洗涤缓冲液中，由此得到弧菌电感受态细胞；所述的洗涤缓冲液含有：133‑266mM蔗糖、1‑5mM 4‑羟乙基哌嗪乙磺，溶剂为水。
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