[发明专利]检测CpG ODN序列纯度的方法及应用有效
| 申请号： | 201410391955.4 | 申请日： | 2014-08-11 |
| 公开（公告）号： | CN104195235A | 公开（公告）日： | 2014-12-10 |
| 发明（设计）人： | 杨喆;马波;王丽丽;徐娅妮;李镭;何丽芳;李伟;代云波;柴俊东;钱雯 | 申请（专利权）人： | 云南沃森生物技术股份有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;G01N30/89 |
| 代理公司： | 武汉科皓知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 42222 | 代理人： | 张火春 |
| 地址： | 650106 云南省昆明*** | 国省代码： | 云南;53 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种使用反相柱、适宜的流动相和洗脱程序进行CpG ODN纯度的检测的方法。能把CpG ODN合成过程中缺失的一个碱基（n-1）、两个碱基（n-2），或多了的一个碱基（n+1）、两个碱基（n+2）与主要产物（n）分离开，且该方法操作自动化，可定性定量，精密度高，重现性好；本发明还公开了反相层析色谱柱对CpG ODN序列纯度进行检测的方法在CpG ODN序列纯度检测中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 检测 cpg odn 序列 纯度 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种使用反相层析色谱柱对CpG ODN序列纯度进行检测的方法，该方法是： 1）上Xbridge OST C18柱的反相层析色谱柱；2）输入参数，检测波长245nm；流速 0.1~1ml/min；柱温30~80℃3）用A、B液两种流动相进行梯度洗脱；4）用A液平衡色谱柱，待基线平稳后准备上样；5）上样，取20цl样，注入上样阀，将阀门扳下；6）进行分离，鉴定；7）打印结果，并分析，可得到峰数，峰高，面积百分比，保留时间等参数；其中：A液为10~50 mM TEA和 200~800 mM 六氟异丙醇溶液组成；B液为20%~80%甲醇的10~50mM TEA和 200~800 mM 六氟异丙醇溶液组成；洗脱方式是在60min内A液从100%~0%，B液从0%~100%的顺序梯度浓度进行洗脱。
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