[发明专利]一种人血管内皮祖细胞的高效扩增培养体系

摘要

本发明涉及一种人血管内皮祖细胞的高效扩增培养体系。本发明提供了一种内皮祖细胞的高效扩增培养方法，使得CD34⁺单个核细胞在保持其原来干性特征的基础上实现有效和大量的扩增，本发明人还优化了内皮生长因子组合贴壁培养技术，对内皮祖细胞进行扩增及分化。本发明的技术方案可提供大量的内皮祖细胞，可解决移植治疗缺血性疾病以及甲型血友病的内皮祖细胞或内皮细胞的来源和数量问题。

主权项

1.一种培养人血管内皮祖细胞的方法，其特征在于，所述方法包括：(1)利用干细胞扩增培养基扩增CD34+单个核细胞；(2)将步骤(1)扩增后的细胞转移到内皮祖细胞培养基中培养，获得人血管内皮祖细胞；其中，所述的干细胞扩增培养基由干细胞基础培养基以及如下细胞因子组成：干细胞因子：50‑500ng/mL；Flt3‑配体：50‑500ng/mL；血小板因子：5‑200ng/mL；白介素3：5‑250ng/mL；粒细胞集落刺激生物因子：5‑25ng/mL；和Sall样蛋白4B：1‑10ng/mL；其中，所述的内皮祖细胞培养基由内皮细胞基础培养基以及如下组分组成：血管内皮生长因子：10‑100ng/mL；胰岛素样生长因子：5‑100ng/mL；表皮细胞生长因子：2‑20ng/mL；成纤维细胞生长因子：5‑100ng/mL；抗坏血酸：0.5‑5μg/mL；肝素：50‑200U/mL；氢化可的松：80‑300ng/mL；和L谷胺酰胺：1‑5mM。