[发明专利]一种有抑制酪氨酸酶活性的漆树多酚提取物及其制备方法

摘要

本发明涉及一种有抑制酪氨酸酶活性的漆树多酚提取物及其制备方法，属于天然药物化学与化妆品的开发和应用领域。以漆树木质为原料、经过提取、萃取、大孔树脂纯化和干燥得到漆树多酚提取物。本发明制备的漆树多酚提取物含量高、抑制作用明显，漆树多酚含量>50%，对酪氨酸酶活性的抑制率>60%，其原料天然、无毒，因此利用漆树多酚开发天然酪氨酸酶抑制剂，用于美白化妆品、预防和治疗由于人体黑色素过多导致的沉着性疾病，具有很好的商业前景。

主权项

一种有抑制酪氨酸酶活性的漆树多酚提取物及其制备方法，其特征在于由以下步骤组成：第一步将漆树木材干燥、粉碎，去渣，按质量体积比为1:5~1:30(g:mL)，加入质量分数为50~95%的乙醇水溶液，常温或加热回流提取、或减压回流提取、或超声波辅助提取或微波辅助提取2~3次，每次10min~10h，过滤，滤液合并，于40~60℃下减压蒸发除去溶剂，再经真空干燥或冷冻干燥，得到粗提物；第二步粗提物按质量比1:5~1:10(g:mL)加入蒸馏水，搅拌溶解，加入石油醚萃取3~5次，分离，在40~60℃下减压蒸发除去溶剂，得到石油醚萃取物；水层继续用乙酸乙酯萃取3~5次，分离，在40~60℃下减压蒸发除去溶剂，干燥得到乙酸乙酯相;第三步将乙酸乙酯萃取物按质量比1:5~1:10加入质量分数为10%的乙醇水溶液，超声震荡溶解，用大孔吸附树脂柱吸附分离，乙酸乙酯萃取物与大孔吸附树脂质量体积比(g:mL)为1:20~50；先用质量分数为10~20%的乙醇水溶液进行洗脱，洗至无色，除去极性大的杂质，再用质量分数为30~60%的乙醇水溶液进行洗脱，洗脱剂用量为3‑6倍住体积，收集洗脱液，于40~60℃下减压蒸发除去溶剂，真空干燥，即得漆树多酚提取物；第四步将漆树多酚提取物进行HPLC分析，总多酚含量为50~60%，其中漆黄素含量为0.4~0.7%，黄颜木素含量为5~10%，硫黄菊素含量为0.5~1%和紫铆花素含量为0.2~0.5%，漆酚的含量<5PPm;第五步将漆树多酚提取物进行抑制酪氨酸酶活性研究，当浓度范围在400~600ug/mL，抑制率为60~80%，其IC50值为308μg/mL；通过对抑制酪氨酸酶活性的机理研究，其抑制类型为混合型。