[发明专利]一种蜂蜜中雷公藤次碱的检测方法

摘要

本发明涉及蜂蜜中雷公藤生物碱检测领域，尤其涉及一种蜂蜜中雷公藤次碱的检测方法。该方法包括以下的步骤：1）标准溶液的配制，2）试样制备，3）提取，4）净化，5）色谱条件，6）质谱条件；本发明建立了一种固相萃取净化-超高效液相色谱-串联质谱检测蜂蜜中雷公藤次碱的分析方法。样品用水溶解后经固相净化小柱，经HypersilGOLDC18柱（50mm×2.1mm,1.9um）分离，电喷雾离子源正离子多反应监测（SRM）模式串联质谱进行检测，外标法定量。考察并优化了试样溶解溶剂、净化方法、色谱和质谱条件等。本方法快速、灵敏、准确，适用于蜂蜜中雷公藤相关物质残留的定性、定量检测。

主权项

一种蜂蜜中雷公藤次碱的检测方法，其特征在于该方法包括以下的步骤：1）标准溶液的配制标准储备液：称取雷公藤次碱标准品10 mg，精确至0.1 mg，置于100 mL棕色容量瓶中，用甲醇溶解并定容至刻度，混匀配制成100 mg/L的标准储备液；标准中间液：准确移取１mL标准储备液置于100 mL棕色容量瓶中，用甲醇定容至刻度，配成1.0mg/L的混合标准中间液；标准工作液：根据需要移取适量混合标准中间液，用甲醇－水，体积比为1:1，稀释成0.01 ng/mL、0.02 ng/mL、0.1 ng/mL、0.2 ng/mL、0.5 ng/mL、1 ng/mL、2 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、20 ng/mL的标准工作溶液；各种标准溶液避光保存于４℃冰箱中；2）试样制备对未结晶的蜂蜜将其用力搅拌均匀，对有结晶析出的蜂蜜可将样品瓶盖塞紧后，置于不超过60℃的水浴中温热，待样品全部融化后搅拌，迅速冷却至室温，在融化时必须防止水分挥发；3）提取称取试样2.0 g，精确至0.01 g，于15 mL具盖离心管中，加入10 mL水，采用震荡、超声、加热或漩涡方式使其溶解，待净化；4）净化移取试样提取液于固相净化小柱中，使用前依次用5 mL甲醇，5 mL水活化，弃去流出液，然后用5 mL体积比为1:1的甲醇/水溶液淋洗小柱，弃去流出液，最后用5 mL乙腈洗脱，收集洗脱液于带刻度离心管中，氮吹浓缩至近干，最后用体积比为1:1的甲醇/水溶液定容至2 mL，混匀后经0.22µm有机相滤膜过滤后用于上机分析；5）色谱条件色谱柱：Hypersil GOLD C18柱，50mm×2.1mm,1.9um；柱温：35℃；进样量：2uL；流速：0.25 mL/min；流动相：Ａ 为水溶液，Ｂ为含0.15%甲酸的甲醇溶液；梯度洗脱程序：0～2.0min,70%A；2.0～5.0 min,70%A～5%A；5.0～10.0 min,5%Ａ；10.1～14.0min，70%A；6）质谱条件扫描方式：正模式扫描；检测方式：多反应监测；电喷雾电压：+3500 V；鞘气：30 arb；辅助气：10 arb；毛细管温度：350℃；蒸发温度：300℃；碰撞气：氩气；SRM监测离子对：868.468/206.022、868.468/178.028；S‑Lens电压：155 V；碰撞电压：41V:54V;保留时间为6.17 min。