[发明专利]miRNA捕获探针及其修饰电极与捕获探针互补链及其修饰碳纳米管‑金磁纳米粒复合物

摘要

本发明公开了一种miRNA捕获探针及其修饰电极，以及miRNA捕获探针互补链及其修饰的碳纳米管‑金磁纳米粒复合物，并基于上述修饰电极和修饰的碳纳米管‑金磁纳米粒复合物建立了一种检测miRNA的方法，可以实现对miRNA的快速、灵敏、特异和稳定检测。

主权项

利用miRNA捕获探针修饰电极与miRNA捕获探针互补链修饰的碳纳米管‑金磁纳米粒复合物在非疾病诊断中检测miRNA的方法，其特征在于，以miRNA捕获探针修饰电极为工作电极、铂电极为对电极、饱和甘汞电极为参比电极组建miRNA电化学生物传感器；在miRNA捕获探针修饰电极表面滴加含有辅助探针、核酸内切酶和待测miRNA的溶液，37℃孵育，用水清洗电极表面，待干后再滴加miRNA捕获探针互补链修饰的碳纳米管‑金磁纳米粒复合物，37℃孵育，用水清洗电极表面，然后在PBS缓冲液中进行差动脉冲伏安法扫描，检测电流峰值，进而对待测miRNA进行定性和定量分析；所述miRNA捕获探针为单链DNA，从5’端至3’端依次含有与miRNA部分互补片段、核酸内切酶酶切位点以及与辅助探针部分互补片段，其3’末端还修饰有巯基；所述辅助探针为单链DNA，从5’端至3’端依次含有与捕获探针部分互补片段以及与miRNA部分互补片段；所述miRNA捕获探针中含有的与miRNA部分互补片段和所述辅助探针中含有的与miRNA部分互补片段不重叠；所述miRNA捕获探针的互补链与miRNA捕获探针中核酸内切酶剪切点下游序列互补，其3’末端还修饰有氨基。