[发明专利]基于高通量测序技术的全血免疫组库探测方法有效
| 申请号： | 201410442470.3 | 申请日： | 2014-09-02 |
| 公开（公告）号： | CN104263818A | 公开（公告）日： | 2015-01-07 |
| 发明（设计）人： | 王凯;高帆 | 申请（专利权）人： | 武汉凯吉盈科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 武汉河山金堂专利事务所 42212 | 代理人： | 胡清堂 |
| 地址： | 430000 湖北省武汉市高*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | 本发明提供了基于高通量测序技术的全血免疫组库探测方法，该方法包括以下步骤：(1)全血样本中直接提取RNA(2)从RNA逆转录产生单链cDNA，将寡核苷酸接头序列连接到单链cDNA的3'末端，采用通用引物和序列为GAC CTC GGG TGG GAA CAC的特殊靶向引物P-VDJ为PCR反应的特殊引物对、连接寡核苷酸接头序列后的单链cDNA为PCR模板进行PCR反应，对免疫受体基因组进行扩增(3)高通量测序。该方法所用RNA直接从全血液样本中提取更适用于临床，使用单一的靶特异性引物，去均一地扩增亚型T细胞受体基因的可变区域，通过Illumina公司的Hi-SEQ 2500加条形码方式测序，确保了相对较低的成本,少于48小时的测序时间和良好的测序深度。 | ||
| 搜索关键词： | 基于 通量 技术 免疫 探测 方法 | ||
【主权项】：
基于高通量测序技术的全血免疫组库探测方法，该方法包括以下步骤：(1)全血样本中直接提取RNA；(2)从RNA逆转录产生单链cDNA，将寡核苷酸接头序列连接到单链cDNA的3'末端，采用通用引物和序列为GAC CTC GGG TGG GAA CAC的特殊靶向引物P‑VDJ为PCR反应的特殊引物对、连接寡核苷酸接头序列后的单链cDNA为PCR模板进行PCR反应，对免疫受体基因组进行扩增；(3)高通量测序。
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