[发明专利]纯化牛跟腱胶原蛋白的方法及其海绵的制备

摘要

本发明涉及纯化胶原蛋白的方法，目的是通过采用新的方法充分粉碎牛跟腱，纯化胶原蛋白中用调节pH析出胶原法代替盐析、透析脱盐法，海绵成型工艺中不添加化学交联剂，简易工艺流程，提高胶原蛋白的提取率，达到高合格率的胶原蛋白海绵，以及采用所述的胶原蛋白制备止血海绵。

主权项

1.纯化牛跟腱胶原蛋白及其医用胶原蛋白海绵制备的方法，包括以下步骤：1）用刀片将置于‑20℃速冻的牛跟腱去除筋膜，肌肉和脂肪等杂质，用切片机切成0.3mm厚，再用组织搅碎机充分粉碎；2）用稀碱液溶液除去杂蛋白6~8小时，用蒸馏水洗至中性，再用醇类物质脱脂，用蒸馏水洗至中性且无异味；3）溶解在pH2~3的稀酸溶液中；4）向上述溶液中加入胃蛋白酶，4℃下搅拌48~72小时；5）将提取液离心，收集上清液，用10mol/L氢氧化钠将胶原溶液调至中性，收集得到的胶原沉淀，先加入0.5mol/L的醋酸溶解胶原沉淀，再加入胶原溶液两倍体积的超纯水充分搅拌水洗，离心取沉淀，继续加两倍体积的超纯水洗涤，如此重复操作，洗涤至胶原溶液为中性，即可得到高纯度的胶原蛋白；6）将胶原溶液搅拌均匀，分装于培养皿中，在‑20℃下预冻6~8小时，用冷冻干燥机冻干得到胶原海绵状材料；7）用Co60辐照灭菌，包装，入库。