[发明专利]一种用于检测白色念珠菌的噬菌体复合纳米线有效
申请号: | 201410456311.9 | 申请日: | 2014-09-09 |
公开(公告)号: | CN105467126B | 公开(公告)日: | 2018-01-09 |
发明(设计)人: | 王丽;王一存 | 申请(专利权)人: | 东北师范大学 |
主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;G01N33/68 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 130024 吉*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于检测白色念珠菌的噬菌体复合纳米线。本发明所提供的噬菌体复合纳米线具体为用于检测Sap2抗体的噬菌体复合纳米线,由噬菌体和磁性纳米颗粒组成;所述噬菌体展示有Sap2蛋白表位多肽和磁性纳米颗粒结合多肽,所述Sap2蛋白表位多肽的氨基酸序列如序列表中序列1所示,所述磁性纳米颗粒结合多肽的氨基酸序列如序列表中序列2所示。实验证明,与现有检测Sap2抗体的ELISA方法相比,本发明成本低廉,操作简单,检测过程中无需特殊仪器设备,因此能广泛应用于医院及科学研究,特别适用于农村及基层单位使用。这对白色念珠菌感染的早期发现具有重要意义。 | ||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 白色 念珠菌 噬菌体 复合 纳米 | ||
【主权项】:
一种用于检测Sap2抗体的噬菌体复合纳米线,由噬菌体和磁性纳米颗粒组成;所述噬菌体展示有Sap2蛋白表位多肽和磁性纳米颗粒结合多肽,所述Sap2蛋白表位多肽的氨基酸序列如序列表中序列1所示,所述磁性纳米颗粒结合多肽的氨基酸序列如序列表中序列2所示;所述磁性纳米颗粒的粒径为10nm;所述噬菌体复合纳米线中,每个所述噬菌体的表面结合29‑39个所述磁性纳米颗粒;所述噬菌体是按照包括如下步骤的方法制备得到的:(a1)将所述Sap2蛋白表位多肽的编码基因插入到序列5所示的噬菌体载体的两个酶切位点Bgl Ⅰ之间,得到重组载体;将所述磁性纳米颗粒结合多肽的编码基因插入到所述重组载体的酶切位点PstⅠ和Hind Ⅲ之间,得到重组噬菌体载体;(a2)将所述重组噬菌体载体转化大肠杆菌,得到重组菌;(a3)培养所述重组菌,从而获得展示有所述Sap2蛋白表位多肽和所述磁性纳米颗粒结合多肽的噬菌体;制备所述的噬菌体复合纳米线的方法,包括如下步骤:(1)按照上述步骤(a1)‑(a3),制备得到展示有所述Sap2蛋白表位多肽和所述磁性纳米颗粒结合多肽的噬菌体;(2)将所述磁性纳米颗粒与所述噬菌体按照100μg :4.8×1011pfu比例于20‑25℃共同孵育3 h,得到所述噬菌体复合纳米线。
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