[发明专利]一种快速检测鹿粘膜病病毒BVDV的方法

摘要

本发明提供了一种快速检测鹿粘膜病病毒BVDV的方法，通过将LDR与PCR技术相结合的检测导致梅花鹿粘膜病的BVDV，具体为：首先，从NCBI中下载BVDV全序列，通过软件比对BVDV的5’-UTR进行病毒特异性序列的设计，并以副猪嗜血杆菌的引物为通用引物进行探针合成；探针包括上游探针和下游探针，上游探针从左到右依次是上游通用引物对应序列、上游病毒特异序列，下游探针从左到右依次是下游病毒特异序列、下游通用引物对应序列。以病毒基因组RNA反转录的cDNA为模板进行LDR、PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳检测。此方法的建立对鹿粘膜病病毒的流行病学调查和疫情控制具有重要的意义。

主权项

一种快速检测鹿粘膜病病毒BVDV的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)探针的设计根据BVDV的5’‑UTR设计病毒特异性序列，以副猪嗜血杆菌的引物为通用引物序列，得到探针，所述探针包括：上游探针序列(5’‑3’)：TTACCGGCGAGAAGAGTTGGGCATAGCGAGGGCATGCCCACAGCACATCT；下游探针序列(5’‑3’)：TAACCTGGACGGGGGTCGCCTCACGAAGGGCAATTAATGGCGGAT；(2)BVDV的检测通过上述上、下游探针以病毒基因组RNA反转录的cDNA模板进行LDR反应，得到连接产物；通过上述通用引物序列以所述连接产物为模板进行PCR反应，得到扩增产物，琼脂糖凝胶电泳检测电泳产物确定BVDV。