[发明专利]一种碗蕨悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
| 申请号： | 201410463013.2 | 申请日： | 2014-09-12 |
| 公开（公告）号： | CN104170746A | 公开（公告）日： | 2014-12-03 |
| 发明（设计）人： | 杨存 | 申请（专利权）人： | 南京通泽农业科技有限公司 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 无 | 代理人： | 无 |
| 地址： | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明研究了一种碗蕨悬浮细胞培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养等步骤，本发明方法所制备的碗蕨悬浮细胞增殖率高，生长周期短，遗传稳定性好，为碗蕨药用次生代谢产物的开发和利用提供新的途径。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】：
一种碗蕨悬浮细胞培养的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养，其主要步骤如下：（1）取碗蕨幼嫩的叶片，在超净工作台上对其进行消毒处理；（2）取步骤（1）消毒处理过的叶片接种入N6+KT1mg/L+2,4‑D2mg/L+0.5g/L活性炭培养基中进行愈伤组织诱导，附加6.5g/L琼脂，30g/L蔗糖，暗室培养，温度20℃；（3）取步骤（2）中诱导出来的碗蕨愈伤组织接入N6+KT1mg/L+2,4‑D1mg/L进行愈伤组织继代增殖培养，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1500lx，温度20℃；（4）取步骤（3）增殖后的愈伤组织筛选长势稳定均一的愈伤组织接种入液体培养基6,7‑V+ NAA0.1‑0.2mg/L+6‑BA0.1‑0.2mg/L+Zn2+，Ca2+，Mg2+0.5‑2mmol/L中进行悬浮振荡培养，4‑5周后取出，烘干。
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