[发明专利]一种节果决明悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410463187.9 | 申请日: | 2014-09-12 |
公开(公告)号: | CN104255476A | 公开(公告)日: | 2015-01-07 |
发明(设计)人: | 杨存 | 申请(专利权)人: | 南京通泽农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明研究了一种节果决明悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养等步骤,本发明方法所制备的节果决明悬浮细胞长势好,增殖系数高,生长周期短,操作简单,为节果决明工业化开发提供基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 果决 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】:
一种节果决明悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的增殖、悬浮细胞的培养,其主要步骤如下:(1)春季取节果决明幼嫩的叶片,在超净工作台上对其进行消毒处理;(2)取步骤(1)消毒处理过的叶片接种入MS+IAA0.5mg/L+6‑BA2.5mg/L+半胱氨酸150mg/L培养基中进行愈伤组织诱导,附加6.5g/L琼脂,30g/L蔗糖,暗室培养,温度25℃;(3)取步骤(2)中诱导出来的节果决明愈伤组织接入ER+KT0.3mg/L+2,4,5‑T0.3mg/L+麦芽提取液0.05%进行愈伤组织增殖,附加蔗糖30g/L,琼脂6.5g/L,pH5.8,光照2000lx,温度25℃;(4)取步骤(3)增殖后的愈伤组织筛选长势稳定均一的愈伤组织接种入液体培养基ER+ NAA0.1‑0.2mg/L+2,4‑D0.3‑0.5mg/L+0.4‑0.5mmol/L腐胺中进行悬浮振荡培养,4‑5周后称重计算增殖率。
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