[发明专利]一种水蓑衣悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410463195.3 | 申请日: | 2014-09-12 |
公开(公告)号: | CN104170747A | 公开(公告)日: | 2014-12-03 |
发明(设计)人: | 杨存 | 申请(专利权)人: | 南京通泽农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 无 | 代理人: | 无 |
地址: | 210046 江苏省南京市*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明研究了一种水蓑衣悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变增殖、悬浮细胞的培养等步骤,本发明方法所制备的水蓑衣悬浮细胞生长分裂速度快,产量高,可获得大量药用次生代谢产物含量高的悬浮细胞。 | ||
搜索关键词: | 一种 蓑衣 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】:
一种水蓑衣悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌叶片的获得、愈伤组织的诱导、愈伤组织的诱变增殖、悬浮细胞的培养,其主要步骤如下:(1)采取水蓑衣幼嫩的叶片,在超净工作台上对其进行消毒处理;(2)取步骤(1)消毒处理过的叶片接种入N6+2,4‑D1mg/L+50mg/L半胱氨酸+3%蔗糖+0.65%琼脂中进行愈伤组织诱导,光照强度600lx,光期5h,暗期19h;(3)取步骤(2)中诱导出来的水蓑衣愈伤组织接入N6+2,4‑D1.0mg/L+6‑BA5.0mg/L+3%蔗糖+0.65%琼脂,附加0.005%‑0.1%的(EMS)进行愈伤组织的诱变增殖,pH5.8,光照1200lx,温度28℃;(4)取步骤(3)增殖后筛选嫩绿松散的愈伤组织接入液体培养基N6+2,4‑D0.5‑1.0mg/L+6‑BA4.0‑5.0mg/L+3%蔗糖+0.65%琼脂+50‑80mg/L酵母,30天后称重,计算增殖率。
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