[发明专利]一种真菌发酵液及其应用

摘要

本发明涉及一种真菌YMF 1.00864发酵液及其应用，属于应用微生物学技术领域。本发明的真菌YMF 1.00864发酵液，用保藏号为CGMCC No.7407的青霉(Penicillium sp.)YMF 1.00864菌种经真菌的培养和发酵液的收集和萃取步骤得到。本发明的真菌YMF 1.00864发酵液在制备分离胆酸及鹅去氧胆酸中的应用。本发明的有效果在于首次从真菌发酵液中生产制备胆酸及鹅去氧胆酸，由于真菌易培养、周期短及可再生，为胆酸及鹅去氧胆酸的生产提供了一条新资源以及新技术方法。

主权项

一种真菌YMF 1.00864发酵液，其特征在于该真菌YMF 1.00864发酵液经如下步骤得到：(1)真菌的培养将先在YGP固体培养基中活化3天的保藏号为CGMCC No.7407的青霉(Penicillium sp.)YMF 1.00864菌种保存在PDA固体培养基斜面上，使用时，在无菌条件下切取2cmx2cm的菌块，分别接种于灭菌的YGP、CML、YGS、BEP、YBS液体培养基250mL中，在28℃发酵3天，然后用液体接种法接种YGP液体培养基中，每瓶接种量为25mL，培养条件为500mL三角瓶装量250mL，每株菌发酵5L,28℃，180rpm培养12天；其中：PDA固体培养基为：去皮马铃薯200g，切成小块后煮沸30min，4层纱布过滤，在滤液中加入20g葡萄糖，加水定容至1L，加入1.5％(m/v)的琼脂，121℃灭菌20分钟后待用；YGP固体培养基为：酵母膏5g，葡糖糖10g，蛋白胨1g，放入水中加热至完全溶解，加水定容至1L，加入1.5％(m/v)的琼脂则为固体培养基，121℃灭菌20分钟后待用；CML液体培养基为：称取20g玉米粉，加适量水煮沸30min，4层纱布过滤，定容至1L，21℃灭菌20min；YGS液体培养基为：称取5g酵母膏、1g大豆蛋白，10g葡萄糖，放入水中加热至完全溶解，加水定容至1L，121℃灭菌20min；BEP液体培养基为：称取2g牛肉膏、1g蛋白胨、10g葡萄糖，放入水中加热至完全溶解，加水定容至1L，121℃灭菌20min；YBS液体培养基为：称取2g酵母膏、1g大豆蛋白胨、1g牛肉膏，10g葡萄糖，放入水中加热至完全溶解，加水定容至1L，121℃灭菌20min；YGP液体培养基为：酵母膏5g，葡糖糖10g，蛋白胨1g，放入水中加热至完全溶解，加水定容至1L，121℃灭菌20分钟后待用；(2)发酵液的收集和萃取将上述真菌YMF 1.00864发酵液过滤得到菌液部和菌丝体部，菌液部分常规减压浓缩后用乙酸乙酯以体积比1:1萃取三次，合并乙酸乙酯部，减压浓缩蒸干，得到真菌YMF 1.00864发酵液乙酸乙酯部粗提物。