[发明专利]一种定点突变RNase ZS1获得温敏不育系的方法在审
| 申请号： | 201410496037.8 | 申请日： | 2014-09-24 |
| 公开（公告）号： | CN104293827A | 公开（公告）日： | 2015-01-21 |
| 发明（设计）人： | 周海;庄楚雄;陈亮;李静;姜大刚 | 申请（专利权）人： | 华南农业大学 |
| 主分类号： | C12N15/82 | 分类号： | C12N15/82;C12N15/84;C12Q1/68;A01H5/00;A01H4/00 |
| 代理公司： | 广州市越秀区哲力专利商标事务所(普通合伙) 44288 | 代理人： | 汤喜友 |
| 地址： | 510642*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种定点突变RNase ZS1获得温敏不育系的方法，其包括根据RNase ZS1设计靶标序列的步骤；和构建含靶标序列片段的pU3-gRNA载体的步骤；和构建含靶标序列片段的pCRISPR/Cas9载体的步骤；和获得转基因苗的步骤；和突变位点的鉴定步骤；以及获得不带转基因成分的温敏不育系的步骤。本发明的方法彻底的失活了RNase ZS1蛋白的活性，实现人工培育不带转基因成分的温敏不育系，同时与利用化学、物理诱变获得的突变体没有本质的区别，具有目的性强，基因组的损伤小，规避了转基因带来的可能风险。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 定点 突变 rnase sup s1 获得 不育 方法 | ||
【主权项】：
一种定点突变RNase ZS1获得温敏不育系的方法，其特征在于：其包括利用CRISPR/Cas9系统根据RNase ZS1(Os02g0214300或LOC_Os02g12290)设计靶标序列的步骤；和构建含靶标序列片段的pU3‑gRNA载体的步骤；和构建含靶标序列片段的pCRISPR/Cas9载体的步骤；和获得转基因苗的步骤；和突变位点的鉴定步骤；以及获得不带转基因成分的温敏不育系的步骤。
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