[发明专利]一种3’-5’外切酶活性测定方法有效
申请号: | 201410502154.0 | 申请日: | 2014-09-28 |
公开(公告)号: | CN104293930A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
发明(设计)人: | 徐晓昱;王静 | 申请(专利权)人: | 南京诺唯赞生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/44 |
代理公司: | 南京正联知识产权代理有限公司 32243 | 代理人: | 王素琴 |
地址: | 210014 江苏省*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种非放射性的3’-5’外切酶活性测定方法,所述方法包括:首先根据单链模板合成有3’错配的引物,将引物与单链模板混合并退火,接着在该反应液中加入3’-5’外切酶活性进行3’碱基外切反应,然后加入足量没有3’-5’外切酶活性的聚合酶延长引物直至获得双链DNA,随后检测反应体系中双链DNA的相对量,由该检测结果推导出外切酶活性程度。该方法与现有技术方法相比,无放射性污染,操作步骤简单快速,可以实现高通量的自动化活性测定,可以用来筛选针对3’-5’外切酶的封闭活性。 | ||
搜索关键词: | 一种 外切 活性 测定 方法 | ||
【主权项】:
一种3’‑5’外切酶活性测定方法,其特征在于,所述方法包括:首先根据单链模板合成有3’错配的引物,将引物与单链模板混合并退火,接着加入3’‑5’外切酶活性进行3’碱基外切反应,然后加入足量没有3’‑5’外切酶活性的聚合酶延长引物直至获得双链DNA,随后检测反应体系中双链DNA的相对量,并根据检测结果推导出3’‑5’外切酶活性程度。
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