[发明专利]一种环介导等温扩增引物在制备检测牛边缘无浆体病原的试剂中的用途在审
申请号: | 201410509621.2 | 申请日: | 2014-09-18 |
公开(公告)号: | CN104293936A | 公开(公告)日: | 2015-01-21 |
发明(设计)人: | 倪宏波;王欣;王云光;安先全;蒋慧婷 | 申请(专利权)人: | 黑龙江八一农垦大学 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 163319 黑龙江*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 本发明公开了一种环介导等温扩增引物在制备检测牛边缘无浆体病原的试剂中的用途,特异性LAMP引物根据Msp5基因设计3对引物:外,内,环引物,正向外引物命名为Msp5-F3b,反向外引物命名为Msp5-B3b,正向内引物命名为Msp5-FIPb,反向内引物命名为Msp5-BIPb,为了加速反应设计环路引物,其中包括正向环引物Msp5-LFb和反向环引物Msp5-LBb,三对的外引物用于PCR检测。在63℃条件下进行LAMP反应20分钟后,LAMP产物在0.8%琼脂糖凝胶电泳显示呈阶梯状图案。该方法具有高特异性,高灵敏度,时间短且操作简便的特点。 | ||
搜索关键词: | 一种 环介导 等温 扩增 引物 制备 检测 边缘 无浆体 病原 试剂 中的 用途 | ||
【主权项】:
一种环介导等温扩增引物在制备检测牛边缘无浆体病原的试剂中的用途,其特征在于,特异性LAMP引物根据Msp5基因设计3对引物:外,内,环引物,正向外引物命名为Msp5‑F3b,反向外引物命名为Msp5‑B3b,正向内引物命名为Msp5‑FIPb,反向内引物命名为Msp5‑BIPb,为了加速反应设计环路引物,其中包括正向环引物Msp5‑LFb和反向环引物Msp5‑LBb,三对的外引物用于PCR检测;Msp5‑F3b ACCTTCTGCTGTTCGTTGMsp5‑B3b GAGAAGCCATGCCTAACTCMsp5‑FIPb GTTGAAAGACGCGGAGGCTAAATCGGCGA(F1c+F2) GAGGTTTACMsp5‑BIPb CCGTCAGTAGCGGCGATTTGTACTTACAGG(B1c+B2) CTGAGAAGCMsp5‑LFb TGCCCTCACTTACAACTTCGMsp5‑LBb CGGCAAGCACATGTTGGTA。
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