[发明专利]一种采用卵生型手段繁育幼生型牡蛎的方法

摘要

本发明公开了一种采用卵生型手段繁育幼虫型牡蛎的方法。本发明通过亲本采集、性腺促熟、精卵分离、子代培育等流程，获得大量幼生型牡蛎子代。本发明打破了传统上认为幼生型牡蛎无法通过解剖方式进行子代繁育的观念，首次通过解剖精卵模式培育出幼生型牡蛎苗种，为其大规模繁殖提供了技术保证，为该类牡蛎的常规数量遗传育种及染色体操纵育种等提供了可能，也为该类牡蛎资源恢复奠定了理论与实践基础。本发明具有操作简便、实用性强、易于大规模推广等优点。

主权项

一种采用卵生型手段繁育幼生型牡蛎的方法，其特征在于，包括以下步骤：a、亲本采集：在自然海区采集野生的牡蛎属幼生型牡蛎作为繁殖群体；b、性腺促熟：以自然条件下性腺发育较好的步骤a的繁殖群体或者促熟的步骤a的繁殖群体作为亲本；c、精卵分离：待亲本性腺成熟，分离精卵，之后进行受精，得到受精卵；d、子代培育：采用充气方式孵化受精卵，孵化密度控制在≤50个/mL，受精卵在温度28.2‑29.4℃，盐度27‑30ppt条件下，得到D形幼虫，之后按照常规方法培养子代，即可获得牡蛎苗种；所述的步骤c的待亲本性腺成熟，分离精卵，之后进行受精，得到受精卵，具体为：卵子收集方法：将亲本的成熟性腺解剖在盐度3‑5ppt水中，浸泡2‑5min，将其精子杀死，之后经过200目筛绢网过滤，去除大的组织块，400目筛绢网浓缩，去除小的碎组织块及死亡精子，滤液放置于盐度为27‑30ppt海水中进行30‑60min浸泡激活卵子，激活成功的标准是卵变圆，生发泡消失；精子收集方法：通过镜检选择精子活力好的个体性腺，经过400目筛绢网过滤，去除卵子及大的组织块，滤液即为精子，之后在海水激活5‑15min，选取精子活性比例高的个体作为父本；受精前，检查卵子是否被精子污染，弃掉被污染个体卵液，使用尚未受精且激活好的卵子，最后，将精子倒入卵液中受精，每个卵子周围有3‑5个精子，得到受精卵。