[发明专利]一种那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法在审
| 申请号： | 201410513049.7 | 申请日： | 2014-09-29 |
| 公开（公告）号： | CN104313109A | 公开（公告）日： | 2015-01-28 |
| 发明（设计）人： | 薛正莲;周扬;秦艳飞;赵世光;王洲 | 申请（专利权）人： | 安徽工程大学 |
| 主分类号： | C12Q1/04 | 分类号： | C12Q1/04;C12N15/01;C12R1/46 |
| 代理公司： | 北京科亿知识产权代理事务所(普通合伙) 11350 | 代理人： | 汤东凤 |
| 地址： | 241000 *** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明提供了一种那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法，利用新型ARTP育种系统诱变那西肽活跃链霉菌，通过响应面法优化24深孔板发酵条件，并且利用24深孔板培养法建立高通量筛选突变体的方法，获得高产稳产那西肽突变株。本发明验证24深孔板效价及摇瓶效价之间的相关性，使其筛选方法非常准确快速，同时与传统摇瓶发酵筛选相比，24深孔板法能显著提高那西肽高产菌株的筛选效率。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 活跃 霉菌 高产 菌株 通量 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种那西肽活跃链霉菌高产菌株的高通量筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)采用常压室温等离子体处理那西肽活跃链霉菌150s；(2)将诱变后待筛选的那西肽活跃链霉菌稀释涂布于固体平板，在37±0.5℃下培养72h；(3)用牙签挑取诱变后的单菌落孢子接入每孔装有4～6mL固体培养基的24深孔板中进行固体培养，同时一一对应地用接种铲挖0.2～0.3cm2的菌体接入装有2.55mL种子培养基的24深孔板进行液体培养；种子培养结束分别转接装有0.93mL发酵培养基的24深孔板，发酵培养结束测效价，对应的固体培养孔板菌落作保存，液体培养28±0.5℃，转速260r/min，种子培养40h，发酵120h，固体培养37±0.5℃，72h；(4)接种24深孔板固体培养的菌落于斜面试管培养好后用于摇瓶发酵，测效价。
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