[发明专利]一种细胞内黑色素的快速检测与成像的方法有效

专利信息
申请号: 201410513894.4 申请日: 2014-09-29
公开(公告)号: CN104297225B 公开(公告)日: 2018-02-16
发明(设计)人: 刘智明;杨辉;周艳;郭周义;叶丙刚;陈浩琳;李颂扬;龙佳;林锦 申请(专利权)人: 无限极(中国)有限公司
主分类号: G01N21/65 分类号: G01N21/65
代理公司: 北京集佳知识产权代理有限公司11227 代理人: 王学强
地址: 529156 广东省江*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种细胞内黑色素的快速检测与成像的方法,包括以下步骤配制氨银溶液、氯金酸水溶液和硫代硫酸钠水溶液;(2)取黑色素细胞,采用培养液培养后,制成细胞爬片,将细胞爬片置于氨银溶液中孵育、清洗后,加入氯金酸水溶液孵育、清洗后,再采用硫代硫酸钠水溶液处理后洗净,制得金属‑黑色素复合材料;(3)选用NIR激光,对金属‑黑色素复合材料进行照射,采用拉曼光谱仪器进行信号采集并成像,从成像图中获取黑色素的定位和分布信息以及每个黑色素检测点的量化光谱曲线及强度值,实现黑色素的快速检测与成像。该方法灵敏度高、检测时间短,可定性和定量检测细胞内黑色素。
搜索关键词: 一种 细胞内 黑色素 快速 检测 成像 方法
【主权项】:
一种细胞内黑色素的快速检测与成像的方法,其特征是包括以下步骤:(1)配制氨银溶液、氯金酸水溶液和硫代硫酸钠水溶液;(2)取黑色素细胞,采用培养液培养后,制备细胞爬片,将细胞爬片置于步骤(1)配制的氨银溶液中,调节温度为56~60℃孵育5~20min,清洗后加入步骤(1)配制的氯金酸水溶液孵育2 ~5min,清洗后再采用步骤(1)配制的硫代硫酸钠水溶液处理1~3min后洗净,制得金属‑黑色素复合材料;(3)选用NIR激光,对金属‑黑色素复合材料进行照射,采用拉曼光谱仪器进行信号采集,选取1000~1700 cm‑1范围的光谱强度值进行成像,从成像图中获取黑色素的定位和分布信息以及每个黑色素检测点的量化光谱曲线及强度值,实现细胞内黑色素的快速检测与成像;步骤(1)中氨银溶液的配制过程是:选取硝酸银水溶液,逐滴加入氨水,边加边摇晃,直到沉淀颗粒消失,然后再加入硝酸银水溶液,直到液体出现非常浅的乳白色时停止滴加,其中硝酸银水溶液的浓度为40~50 g/L;步骤(1)中氯金酸水溶液的浓度为4~5 mM,硫代硫酸钠水溶液的浓度为40~60 g/L。
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