[发明专利]一种定量检测茜草中芦西丁含量的方法

摘要

本发明公开了一种定量检测芦西丁含量的方法，为高效液相色谱–质谱联用法，是先用高效液相色谱仪进行高效液相分离，再利用质谱仪将母子离子对中质荷比为269.1/223.3及269.1/251.1的子离子作为特征碎片离子进行监测，获得测试品与对照品的多反应监测模式色谱图，然后进行比对、对质荷比为269.1/251.1的子离子色谱峰的峰面积进行积分，采用外标法计算测试品中的芦西丁含量。本发明方法具有精密度高、重现性好、回收率高、测定结果准确等优点，可作为微量芦西丁含量的定量检测，尤其可作为茜草药材和制剂中微量芦西丁的含量检测，提高了可能含有芦西丁的植物药材和制剂的用药安全性，具有实用价值。

主权项

一种定量检测茜草中芦西丁含量的方法，为高效液相色谱–质谱联用法，是先用高效液相色谱仪对测试品溶液进行高效液相分离，再利用质谱仪中的多反应监测模式将母子离子对中质荷比为269.1/223.3及269.1/251.1的子离子作为特征碎片离子进行监测，然后将所获得的多反应监测模式色谱图与芦西丁对照品溶液的多反应监测模式色谱图进行比对，当测试品溶液多反应监测模式色谱图中出现与芦西丁对照品溶液多反应监测模式色谱图中的子离子色谱峰保留时间一致的色谱峰时，对质荷比为269.1/251.1的子离子色谱峰的峰面积进行积分，采用外标法计算测试品中的芦西丁含量；其特征在于，高效液相色谱条件为：Agilent 1290高效液相色谱仪，色谱柱长度为50mm，内径为2.1mm，填充剂为十八烷基硅烷键合硅胶，填充剂粒径为1.8μm，流动相为0.1vol％的甲酸水溶液与乙腈按体积比为(65:35)～(70:30)形成的混合溶液，流动相的流速为0.4～0.5mL/分钟，柱温为30～40℃，进样量为2～5μL；质谱条件为：Agilent G6460三重四级杆质谱仪，离子源为电喷雾离子源，MS1及MS2加热器温度为100℃，干燥气温度为350℃，干燥气流量为10.0L/分钟，雾化气压力为40psi，毛细管电压为3500V，监测离子通道为(269.1→251.1)和(269.1→223.3)，驻留时间为200毫秒，碰撞电压为90V，碰撞能量为15V，极性为阴性；芦西丁对照品溶液是浓度为0.04～0.1μg/mL的芦西丁甲醇溶液；测试品溶液是浓度为0.02g/mL的测试品甲醇溶液。