[发明专利]利用纸质微流体进行核酸等温扩增的方法

摘要

本发明一种利用纸质微流体进行核酸等温扩增的方法，包括以下步骤：(1)制备样品DNA溶液；(2)将引物包被在纸质微流体的反应区上，微流体包括由滤纸制成的反应层和至少一层加样层；加样层中心设有加样孔，围绕加样孔均布有多个反应孔，孔口上均涂覆有疏水材料，加样层重叠放置在反应层的上方；反应层上设有由疏水材料画出的与加样孔对应的样品区、与反应孔对应的多个反应区以及反应通道，反应区与反应孔的直径相同，样品区直径小于加样孔直径，反应区通过宽度从反应区到样品区逐渐变小的反应通道与样品区连通；(3)将反应液滴在加样孔中，加热微流体达到扩增温度；(4)观察反应区颜色变化即可得到检测结果。本发明成本低、结果准确。

主权项

一种利用纸质微流体进行核酸等温扩增的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)制备待测样品DNA溶液；(2)根据检测项目，将相应的引物包被在纸质微流体的反应区(22)上，所述纸质微流体包括由滤纸制成的反应层(2)和至少一层加样层(1)，所述加样层(1)重叠放置在反应层(2)的上方，所述加样层(1)中心设有加样孔(11)，所述加样层(1)上围绕加样孔(11)均布有多个反应孔(12)，所述加样孔(11)和反应孔(12)的孔口上均涂覆有疏水材料；所述反应层(2)上设有由疏水材料画出的与加样孔(11)相对应的样品区(21)、与反应孔(12)对应的多个反应区(22)以及反应通道(23)，所述反应区(22)直径与反应孔(12)的直径相同，所述样品区(21)的直径小于加样孔(11)的直径，每个反应区(22)通过一个反应通道(23)与样品区(21)连通，所述反应通道(23)的宽度从反应区(22)到样品区(21)逐渐变小；(3)将步骤1制备的待测样品DNA溶液根据检测项目混合成扩增反应体系，滴加在纸质微流体的加样孔中，加热纸质微流体使其温度达到核酸扩增所需要的温度并保持恒温；(4)扩增反应完成后，观察纸质微流体反应区的颜色变化，即可得到检测结果。