[发明专利]GLP‑1或其类似物与抗体Fc片段融合蛋白的制备方法有效
申请号: | 201410531801.0 | 申请日: | 2014-10-11 |
公开(公告)号: | CN104293834B | 公开(公告)日: | 2018-03-23 |
发明(设计)人: | 许必雄;郭颀然;赵红阳 | 申请(专利权)人: | 上海兴迪金生物技术有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C07K19/00;C12P21/02;A61K38/26;A61K47/68;A61P3/10 |
代理公司: | 上海光华专利事务所(普通合伙)31219 | 代理人: | 张艳 |
地址: | 201203 上海市浦东新*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,特别是涉及一种GLP‑1或其类似物与抗体Fc片段融合蛋白的制备方法。本发明提供一种GLP‑1或其类似物与抗体Fc片段融合蛋白的制备方法,包括如下步骤将GLP‑1或其类似物与抗体Fc片段融合蛋白编码序列克隆至表达载体中;将表达载体转染CHO‑DXB11细胞,培养并筛选出阳性细胞株;将所得细胞表达、纯化后,即得所述融合蛋白。本发明所提供的制备方法在CHO细胞系DXB11中表达GLP‑1‑Fc分子,不会产生降解问题,后续的纯化得率大大提高,生物学活性并未减弱,非常适合工艺业化生产需求。 | ||
搜索关键词: | glp 类似物 抗体 fc 片段 融合 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
一种GLP‑1或其类似物与抗体Fc片段融合蛋白的制备方法,包括如下步骤:1)将GLP‑1或其类似物与抗体Fc片段融合蛋白编码序列克隆至表达载体中;2)将表达载体转染CHO‑DXB11细胞,培养并筛选出阳性细胞株;3)使用步骤2所得细胞表达、纯化后,即得所述融合蛋白;所述GLP‑1或其类似物与抗体Fc片段融合蛋白由重组人胰高血糖素样肽‑1或其类似物通过连接肽与具有延长人体内半衰期作用的抗体Fc片段连接形成;GLP‑1或其类似物的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示;连接肽的氨基酸序列如SEQ ID No:7所示;抗体Fc片段为不具ADCC效应子功能的非裂解性Fc,抗体Fc片段的氨基酸序列如SEQ ID No:9所示。
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