[发明专利]一种漏斗泡囊草悬浮细胞培养的快速繁殖方法在审
申请号: | 201410540401.6 | 申请日: | 2014-10-14 |
公开(公告)号: | CN104221869A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
发明(设计)人: | 刘东锋;杨成东 | 申请(专利权)人: | 南京帝道农业科技有限公司 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 211225 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明研究了一种漏斗泡囊草悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养等步骤,本发明方法所制备的漏斗泡囊草愈伤组织稳定、均一、分散性好,悬浮细胞生长良好、增殖速率快,为其药用资源的开发和利用提供技术基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 漏斗 泡囊草 悬浮 细胞培养 快速 繁殖 方法 | ||
【主权项】:
一种漏斗泡囊草悬浮细胞培养的快速繁殖方法,包括无菌外植体的获得、愈伤组织的诱导、悬浮细胞的培养,其主要步骤如下:(1)取漏斗泡囊草的幼嫩叶片,进行消毒处理;(2)取步骤(1)消毒处理过的叶片接入TR+IBA0.3mg/L+6‑BA5mg/L培养基中进行愈伤组织诱导,附加7g/L琼脂,30g/L蔗糖,温度25℃;(3)取步骤(2)诱导出来的愈伤组织高温50℃热处理5min,接入培养基TR+ZT0.1‑0.15µmol/L+酪蛋白水解氨基酸0.25‑0.3g/L中,附加45g/L蔗糖进行悬浮细胞的培养,接种量为1:4,振幅4cm,震动频率120r/min,光照4500lx,光照时间13h/d,温度25℃,悬浮培养出来的愈伤组织放于液氮‑196℃中保存。
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