[发明专利]一种检测半枝莲多糖抗肿瘤机制的研究方法

摘要

本发明公开一种检测半枝莲多糖抗肿瘤机制的研究方法，其检测步骤包括：体内抑瘤实验；ANAE法测定荷瘤小鼠外周血T细胞总数；流式细胞术测定荷瘤小鼠外周血中T细胞亚群及T细胞表面蛋白—CD28；ELISA法检测荷瘤小鼠外周血血清中IL-2和IFN-γ的含量；本发明检测半枝莲多糖体内抗肿瘤及对细胞免疫功能影响的研究方法，揭示了半枝莲多糖在肿瘤治疗上的重大作用，同时推动了植物多糖对机体细胞免疫机制的研究。

主权项

本发明公开一种检测半枝莲多糖抗肿瘤机制的研究方法，其检测步骤包括：a）体内抑瘤实验；b) ANAE法测定荷瘤小鼠外周血T细胞总数；c）流式细胞术测定荷瘤小鼠外周血中T细胞亚群及T细胞表面蛋白—CD28；d）ELISA法检测荷瘤小鼠外周血血清中IL‑2和IFN‑γ的含量；根据权利要求1所述的检测半枝莲多糖抗肿瘤机制的研究方法，其特征在于：所述步骤 a）体内抑瘤实验按如下步骤进行：1）小鼠随机分成6组，每组10只，分别为阴性对照组(生理盐水)；阳性对照组(黄芪多糖，环磷酰胺)；半枝莲多糖低剂量组、中剂量组和高剂量组；2）无菌条件下抽取接种第7 d的生长良好的S180荷瘤小鼠腹水(活癌细胞数>97%)，无菌生理盐水1∶3稀释，按0.2 mL/只(细胞浓度约2×107个/mL)，无菌操作小鼠右前腋皮下接种；3）半枝莲多糖高剂量组200 mg/(kg·d)，中剂量组100 mg/(kg·d)，低剂量组50 mg/(kg·d)，阳性对照组给黄芪多糖100 mg/(kg·d)，阴性对照组给同体积生理盐水；于接种24 h后开始无菌操作腹腔注射给药，1次/d，连续给药7d，停药次日处死小鼠，分别称体重后，分别观察记录小鼠体重、瘤块重、胸腺及脾脏重量；4)数据处理：胸腺指数 =  胸腺重/体重脾指数   =  脾重/体重采用SPSS14.0统计软件进行分析，计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组比较用t检验，p＜0.05表示差异有统计学意义。