[发明专利]金线莲种子与真菌共生萌发快速成苗的方法

摘要

本发明涉及一种金线莲种子与丝核菌共生萌发快速成苗的方法，由金线莲种子与共生真菌共生萌发成原球茎，由共生真菌持续为原球茎提供营养，原球茎成长分化为金线莲幼苗的快速育苗模式。本发明方法简便、成本低廉，整个培育过程仅需一种育苗培养基、仅需一次转移金线莲的原球茎即可成苗，从金线莲种子与真菌共生到培育成金线莲幼苗仅需70—90天的培育期，培育金线莲幼苗的周期比传统的金线莲种子无菌播种育苗周期缩短30—60天以上；所培育出的金线莲幼苗抗病力强，移栽成活率达95%以上，培育过程当中不使用任何化学合成物质，非常容易转化成为大规模工厂化培育金线莲幼苗的模式。

主权项

金线莲种子与真菌共生萌发快速成苗的方法，其特征在于包括以下步骤:（1）金线莲共生萌发真菌的分离、纯化：选取野生金线莲健壮幼苗根状茎的顶端突起部位、或是根状茎的节上突起部位；将这一部位用70%酒精表面消毒3‑5s，置于清水琼脂培养基中培养、分离、纯化；（2）制备金线莲共生萌发真菌的液体菌种：将分离纯化后的金线莲有效共生萌发真菌—丝核菌，保藏号为CGMCC No.9728，从低温保藏的斜面试管活化后，制备成液体共生菌种备用；液体菌种的配制比例为：20%马铃薯提取液∶1—5%山毛榉科树叶提取液∶0.5—1.5%白砂糖；山毛榉科树叶提取液的制备：将山毛榉科树叶与水按1：5的比例混合，煮沸半小时，滤出原液制成；（3）制备金线莲共生萌发丝核菌的固体培养基：培养基由山毛榉科树叶、山毛榉科木屑、麦麸或米糠按照比例混合，再经过高温杀菌，然后将丝核菌的液体菌种接种到培养基上，在温度为25℃—27℃的环境下培养，待共生真菌长满整个培养基，等待播种；所述培养基原料配制的比例为：山毛榉科树叶30‑45%∶山毛榉科木屑30‑45%∶米糠或麦麸10‑40%，培养基的含水量为60—62%；（4）金线莲种子的播种与暗培养：将成熟的金线莲种子撒播在长满共生真菌的培养基上，在温度为25—27℃的环境下，暗培养45—60天，金线莲种子与共生真菌共生萌发成长为粗壮的原球茎；（5）金线莲原球茎的转移与光培养：将粗壮的金线莲原球茎转移至山毛榉科树叶：山毛榉科木屑体积比为1：1～1：3的混合基质中，在光照强度为1000‑3000Lux，光照时间为10‑12h/d，温度为25℃‑27℃的条件下，光培养20—30天，成长为具有原生态的仿野生金线莲幼苗。