[发明专利]用于非酶切非色谱纯化方法原核表达融合蛋白Prx的类弹性蛋白多肽ELP有效
申请号: | 201410583428.3 | 申请日: | 2014-10-27 |
公开(公告)号: | CN104387473B | 公开(公告)日: | 2017-10-10 |
发明(设计)人: | 刘宏民;张贵星;王西新;章旭耀;王龙珍;王志茹;袁君;郑一超;赵文;郑甲信 | 申请(专利权)人: | 郑州大学 |
主分类号: | C07K19/00 | 分类号: | C07K19/00;C07K14/00;C12N15/63;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 郑州联科专利事务所(普通合伙)41104 | 代理人: | 时立新 |
地址: | 450001 河南*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公开了一种用于非酶切非色谱纯化方法原核表达融合蛋白Prx的类弹性蛋白多肽ELP,属基因工程领域。本发明改变类弹性蛋白五肽单元中第四个氨基酸的种类提高其弹性功能,从而使减小ELP长度成为可能。使ELP五肽单元中第四个碱基含K、V和F的比例为163。内含肽方面,本发明采用高效内含肽gp41‑1,该内含肽的C端和N端分开表达,并且对其内部基因进行了突变。所述的类弹性蛋白多肽ELP为ELP‑IN和前体蛋白ELP‑IC‑PrxI。利用类弹性蛋白的弹性功能进行非色谱纯化蛋白PrxI,无需使用色谱柱分离,一定温度下孵育,目的蛋白就会沉淀,而且沉淀还可以重新溶解于缓冲溶液中,能使蛋白纯化更加高效快捷。 | ||
搜索关键词: | 用于 非酶切非 色谱 纯化 方法 表达 融合 蛋白 prx 弹性 多肽 elp | ||
【主权项】:
一类弹性蛋白多肽ELP,其特征在于,所述的类弹性蛋白多肽ELP为ELP‑IN或前体蛋白ELP‑IC‑PrxI,ELP‑IN是类弹性蛋白与N端内含肽的组合,ELP‑IC是类弹性蛋白与C端内含肽的组合;ELP‑IN的DNA序列为SEQ ID NO:3,氨基酸序列为SEQ ID NO:4;ELP‑IC的DNA序列为SEQ ID NO:1,氨基酸序列为SEQ ID NO:2。
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