[发明专利]焦磷酸测序法同时检测E2A-PBX1、TEL- AML1和MLL-AF4融合基因的引物对及试剂盒

摘要

本发明公开了一种焦磷酸测序法同时检测E2A-PBX1、TEL-AML1和MLL-AF4融合基因的引物对及包含所述引物对的试剂盒，该试剂盒能够一次性检测E2A-PBX1、TEL-AML1、MLL-AF4(e9/e5)、MLL-AF4(e9/e4)和MLL-AF4(e10/e4)多种融合基因。通过对E2A-PBX1、TEL-AML1、MLL-AF4融合基因的mRNA设计引物，经过逆转录PCR后对产物进行测序分析，本试剂盒可以实现E2A-PBX1、TEL-AML1和MLL-AF4融合基因的快速、准确、高通量的检测。

主权项

一种焦磷酸测序法同时检测E2A‑PBX1、TEL‑AML1和MLL‑AF4融合基因的引物对，其中，所述的MLL‑AF4融合基因包括MLL‑AF4(e9/e5)、MLL‑AF4(e9/e4)和MLL‑AF4(e10/e4)中的任意一种或几种，其特征在于，所述引物对包括：(1)对于E2A‑PBX1基因，扩增引物为：上游引物：5′‑GGCCTCCCGACTCCTACA‑3′，下游引物：5′‑CTGGGGGTCTGTGGGTTC‑3′，其中下游引物的5′端进行生物素标记；测序引物为：5′‑GCTCCTCGGATACTCAA‑3′；(2)对于TEL‑AML1基因：扩增引物为：上游引物：5′‑CCATGCCCATTGGGAGAATAG‑3′，下游引物：5′‑TCGTGGACGTCTCTAGAAGGATTC‑3′，其中下游引物的5′端进行生物素标记；测序引物：5′‑GATTCATTCCAAGTATGC‑3′(3)对于MLL‑AF4(e9/e5)和MLL‑AF4(e9/e4)基因：扩增引物为：上游引物：5′‑CCGCCCAAGTATCCCTGTAAAAC‑3′，下游引物：5′‑AGCGGCTTCACTCAGACCCTAAAGGAGGCGGCCATGAA‑3′，其中下游引物的5′端进行生物素标记；测序引物：5′‑AAAACAAAAACCAAAAGA‑3′(4)对于MLL‑AF4(e10/e4)基因：扩增引物为：上游引物：5′‑TCTCCAATGGCAATAGTTCTAAGC‑3′，下游引物：5′‑GCTCAGCTGTACTAGGCGTATGT‑3′，其中下游引物的5′端进行生物素标记；测序引物：5′‑TGGACTTCATTGGAGTAG‑3′。