[发明专利]同步检测五种猪病毒的液相基因芯片的核酸及其检测方法

摘要

本发明提供一组用于同步检测鉴别五种猪病毒的液相基因芯片的核酸，包括猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪细小病毒(PPV)五种猪病毒的上、下游引物和杂交探针。本发明还提供上述五种猪病毒多重液相芯片高通量分子生物学检测方法。该方法通过提取待检样品中的猪病毒核酸，进行多重不对称核酸扩增联合多重液相基因芯片(悬浮芯片)检测，实现同步准确检测鉴别待测样品中上述五种猪病毒，其特异性强、灵敏度高、稳定性好、操作简便，并具有高通量快速检测的优势。

主权项

一组用于同步检测鉴别五种猪病毒的液相基因芯片的核酸，其特征在于，包括猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV‑2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)和猪细小病毒(PPV)五种猪病毒的上、下游引物和杂交探针，其中，所述PRRSV的上游引物序列如SEQ ID No.1所示，该上游引物序列5’端标记生物素，下游引物序列如SEQ ID No.2所示，杂交探针如SEQ ID No.3所示；所述PCV‑2的上游引物序列如SEQ ID No.5所示，下游引物序列如SEQ ID No.6所示，该下游引物5’端标记生物素，杂交探针如SEQ ID No.7；所述PRV的上游引物序列如SEQ ID No.9所示，下游引物序列如SEQ ID No.10所示，该下游引物5’端标记生物素，杂交探针如SEQ ID No.11所示；所述CSFV的上游引物序列如SEQ ID No.13所示，下游引物序列如SEQ ID No.14所示，该下游引物5’端标记生物素，杂交探针如SEQ ID No.15所示；所述PPV的上游引物序列如SEQ ID No.17所示，下游引物序列如SEQ ID No.18所示，该下游引物5’端标记生物素，杂交探针如SEQ ID No.19所示；其中，所述SEQ ID No.2的第10个碱基i为次黄嘌呤，所述SEQ ID No.3的第13位碱基i为次黄嘌呤；所述五种猪病毒的杂交探针的5’端均标记氨基。