[发明专利]一种人表皮干细胞的分离方法在审
| 申请号： | 201410612797.0 | 申请日： | 2014-11-04 |
| 公开（公告）号： | CN104357380A | 公开（公告）日： | 2015-02-18 |
| 发明（设计）人： | 李新实;苏宁;杨丽;郑洪艳;刘娟;霍彤;赵丹;徐歌;王昌涛 | 申请（专利权）人： | 中国检验检疫科学研究院;北京工商大学 |
| 主分类号： | C12N5/074 | 分类号： | C12N5/074 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;陈晓庆 |
| 地址： | 100123 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种人表皮干细胞的分离方法。该方法包括如下步骤：(1)将离体的人的皮肤组织用DispaseⅡ进行处理；再用胰蛋白酶进行消化处理；(2)将消化处理后的体系静置，分别取沉淀和上清液；(3)将静置所得的上清液进行终止消化，离心，弃上清，取沉淀；对沉淀进行重悬，得到组织液1；(4)将静置所得的沉淀用胰蛋白酶进行消化处理后过滤；(5)将过滤所得的滤液进行终止消化，离心，弃上清，得到组织液2；(6)将组织液1和组织液2混合，得到组织液3，对组织液3进行重悬；(7)对组织液3中的细胞进行筛选，得到人表皮干细胞。本发明的方法具有温和、快速、高效分离表皮干细胞的特点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 表皮 干细胞 分离 方法 | ||
【主权项】：
一种人表皮干细胞的分离方法，包括如下步骤：(1)将离体的人的皮肤组织进行消毒、去除脂肪组织；(2)将经步骤(1)处理后的皮肤组织用Dispase Ⅱ进行处理；(3)将经步骤(2)处理后的组织的真皮部分和表皮部分撕开，并将表皮部分剪碎，用胰蛋白酶进行消化处理；(4)将经步骤(3)消化处理后的体系静置，分别取沉淀和上清液；(5)将经步骤(4)静置所得的上清液进行终止消化，离心，弃上清，收集沉淀；对所述沉淀进行重悬，得到组织液1；(6)将经步骤(4)静置所得的沉淀用胰蛋白酶进行消化处理；(7)将经步骤(6)处理后的体系进行过滤，取滤液；(8)将经步骤(7)过滤所得的滤液进行终止消化，离心，弃上清，得到组织液2；(9)将组织液1和组织液2混合，得到组织液3；对所述组织液3进行重悬；(10)用流式细胞仪对步骤(9)所得的组织液3中的细胞进行筛选，得到所述人表皮干细胞。
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