[发明专利]基于金纳米团簇探针的过氧化氢酶荧光测定方法

摘要

本发明公开一种基于金纳米团簇探针的过氧化氢酶荧光测定方法,其涉及以N‑乙酰‑L‑半胱氨酸保护的金纳米团簇为荧光探针的过氧化氢酶测定方法，其特征是利用Fe²⁺催化H₂O₂产生羟自由基使金纳米团簇的荧光发生猝灭，而过氧化氢酶可催化H₂O₂分解生成H₂O和O₂，抑制金纳米团簇荧光的猝灭，从而表现出荧光发射光谱特征的变化，可以用于过氧化氢酶的检测。在0.01~0.3 U/mL范围内荧光强度变化值ΔF₆₅₀与过氧化氢酶浓度呈线性关系，检测限为0.002 U/mL。本发明灵敏度高，重现性好，可用于食品、工业、环境及生命体系中过氧化氢酶的测定。

主权项

一种基于金纳米团簇探针的过氧化氢酶荧光测定方法，其特征是利用Fe²⁺催化H₂O₂产生羟自由基使金纳米团簇的荧光发生猝灭，而过氧化氢酶能催化H₂O₂分解生成H₂O和O₂，抑制金纳米团簇荧光的猝灭，从而表现出荧光发射光谱特征的变化，能用于过氧化氢酶的检测；所使用的金纳米团簇采用N‑乙酰‑L‑半胱氨酸还原氯金酸的方法制备：将浓度为0.02~0.18 mol/L 的N‑乙酰‑L‑半胱氨酸溶液和浓度为0.1~0.8 mol/L的氢氧化钠溶液加入到浓度为0.01~0.1 g/L的氯金酸溶液中，混匀，置于20~70℃水浴恒温反应2.5小时，反应结束后用截留分子量为3500的透析袋对反应液进行透析纯化处理，得到N‑乙酰‑L‑半胱氨酸保护的金纳米团簇荧光材料水溶液。