[发明专利]基于附睾管腔内环境实验的微灌注方法及其装置

摘要

本发明涉及一种基于附睾管腔内环境实验的微灌注方法及其装置。活体微灌注法进行附睾功能研究国际上报道需在解剖显微镜下从附睾尾部分离附睾管做切口并插管，橡皮泥固定，然后在输精管近端分离伴行血管后插管，插管操作难度较大。本发明在附睾尾部游离附睾管；取玻璃材质的微灌注管，头部拉细，尾部连接硅胶管、注射器和微量注射泵；将微灌注管头部直接插入附睾管，滴组织胶固定，注入干预物质；再在输精管近端不分离伴行血管直接行硅胶管插管，组织胶固定；最后从输精管倒冲，附睾管注射部位开口收集附睾液。本发明优化了活体环境下微灌注操作的步骤，操作简单易行，所需材料均购自国内，大幅缩短了实验周期，提高了实验效率。

主权项

基于附睾管腔内环境实验的微灌注方法，其特征在于：由以下步骤实现：步骤一：对大鼠进行腹腔麻醉，在阴囊正中旁切口暴露附睾；步骤二：解剖显微镜下，在附睾尾部用精细镊去除1mm²的结缔组织，游离环状盘旋的附睾管；步骤三：取玻璃材质的微灌注管，内径0.5 mm，外径0.8 mm，头部由拉管仪拉成细针头，针头尖端外径小于0.2 mm，微灌注管尾部连接内径为0.8 mm的硅胶管，硅胶管另一端连接1 ml的注射器，注射器连接微量注射泵；步骤四：将微灌注管头部的针头插入附睾管，在插管位置点覆组织胶固定微灌注管，微量注射泵以1‑2μl/min的速度注入干预物质；步骤五：30 min后在输精管近端用外径300μm的硅胶管插管，在插管位置点覆组织胶固定插管；步骤六：将附睾管从注射部位开一小口，微量注射泵以45μl/min的速度用PBS倒冲法从输精管将附睾尾部的附睾液冲出并收集。