[发明专利]一种银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器的制备及应用

摘要

本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，其公开了一种银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器的制备及应用，用于快速检测前列腺特异性抗原PSA。其制作方案是：以丝网印刷电极为工作电极，将金纳米溶胶对其进行修饰，然后依次加入PSA抗体、牛血清白蛋白、PSA以及银离子取代羟基磷灰石标记的抗体溶液。金纳米溶胶有利于抗体的固定和火星保持，银离子取代羟基磷灰石具有羟基磷灰石的生物相容性，可以吸附抗体等蛋白质，同时其内部的银离子可在酸性条件下释放出来，使PSA的检测转化为银离子的检测，实现了较高的灵敏度，检测限可低至0.01pg/mL。

主权项

一种银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器的制备方法，包括以下步骤：（1）银离子取代的羟基磷灰石标记抗体的制备将粒径20~60nm的纳米羟基磷灰石和硝酸银以质量比为1 : 1 ~ 3的比例混合，溶于5~10mL水中，震荡10~24小时，离心分离；取1~2mg获得的银离子取代的纳米羟基磷灰石，溶于5mL磷酸盐缓冲溶液，加入0.05~0.1ml浓度为10 µg/mL 的PSA抗体溶液，孵化震荡5~12小时，离心分离；将获得的银离子取代的羟基磷灰石标记抗体重新加入5mL磷酸盐缓冲溶液，并加入1mg的牛血清白蛋白，孵化震荡5~12小时，离心分离；将沉淀重新分散到2~4mL磷酸盐缓冲溶液中，即获得银离子取代的羟基磷灰石标记抗体的储备液；（2）银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器制备取5~20µL金纳米溶胶滴加到丝网印刷电极上，晾干；依次在丝网印刷电极上滴加5~10µL的PSA抗体、牛血清白蛋白、PSA、银离子取代的羟基磷灰石标记抗体溶液，孵化1~4小时，并用磷酸盐缓冲溶液清洗干净，即制得一种银离子取代羟基磷灰石中钙的免疫传感器；所述抗体浓度为10µg/mL，牛血清白蛋白浓度为1%。