[发明专利]一种应用于全基因组重亚硫酸盐测序的PCR扩增体系及文库构建方法在审
申请号: | 201410632658.4 | 申请日: | 2014-11-11 |
公开(公告)号: | CN105648040A | 公开(公告)日: | 2016-06-08 |
发明(设计)人: | 孙子奎;高文学;丁方美;王锋;何再平 | 申请(专利权)人: | 上海派森诺生物科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C40B50/06 |
代理公司: | 上海晨皓知识产权代理事务所(普通合伙) 31260 | 代理人: | 成丽杰 |
地址: | 200231 上海市徐汇*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及分子生物学技术领域,公开了一种应用于全基因组重亚硫酸盐测序的PCR扩增体系及文库构建方法。该PCR扩增体系包含下述组份:超纯水19μl;DNA模板15μl;反应缓冲液5μl;上游引物2.5μl;下游引物2.5μl;2.5mM dNTP 5μl;热启动DNA聚合酶1μl。将该种PCR扩增体系用于全基因组重亚硫酸盐测序过程中对盐处理后的目的片段的PCR扩增步骤,可提高PCR扩增反应的产物浓度,为测序提供足够的上机量。本发明也提供包含上述PCR扩增步骤的重亚硫酸盐测序文库构建方法,该方法可构建足够上机量的甲基化测序文库,有助于全基因组重亚硫酸盐测序的顺利进行。 | ||
搜索关键词: | 一种 应用于 基因组 亚硫酸盐 pcr 扩增 体系 文库 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种应用于全基因组重亚硫酸盐测序的PCR扩增体系,其特征在于,所述扩增体系包含下述组份:超纯水19μl;DNA模板15μl;反应缓冲液5μl;上游引物2.5μl;下游引物2.5μl;2.5mM dNTP5μl;热启动DNA聚合酶1μl。
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