[发明专利]中药制剂壮腰补肾丸的检测方法

摘要

本发明公开了一种中药制剂壮腰补肾丸的检测方法，本方法中设置显微鉴别壮腰补肾丸处方中熟地黄、山药、茯苓、五味子、菊花、黄芪；以当归对照药材、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、川续断皂苷Ⅵ、黄芪甲苷、五味子甲素为对照品，薄层色谱法鉴别壮腰补肾丸处方中是否含有当归、人参、续断、黄芪和五味子成分；高效液相色谱法检测壮腰补肾丸处方中川续断皂苷Ⅵ的含量，本品每1g含续断以川续断皂苷Ⅵ(C₄₇H₇₆O₁₈)计，不得少于0.60mg的定量指标及检验方法，提高了壮腰补肾丸质量标准的可控性，进一步确保产品内在质量和疗效，使质量标准较为完善，提高了药品的质量控制水平。

主权项

一种中药制剂壮腰补肾丸的检测方法，其中所述的药物配方由中药材处方:组成，制法：以上二十味，粉碎成细粉，过筛，混匀，每100g粉末用炼蜜15～30g，加适量的水，制丸，干燥，即得；其特征在于该方法的步骤是：(1)显微鉴别壮腰补肾丸处方中熟地黄、山药、茯苓、五味子、菊花、黄芪，以当归对照药材、人参皂苷Rg₁、人参皂苷Re、人参皂苷Rb₁、川续断皂苷Ⅵ、黄芪甲苷、五味子甲素为对照品，薄层色谱法鉴别壮腰补肾丸处方中是否含有当归、红参、续断、黄芪和五味子成分；(2)以川续断皂苷Ⅵ为对照品，高效液相色谱法检测壮腰补肾丸处方中续断的含量；所述的显微镜鉴别壮腰补肾丸处方中是否含有熟地黄、山药、茯苓、五味子、菊花、黄芪的方法为：取本品，置显微镜下观察，薄壁组织灰棕色至黑棕色，细胞多皱缩，内含棕色核状物为熟地黄；淀粉粒三角状卵形或矩圆形，直径24～40μm，脐点短缝状或人字状为山药；不规则分枝状团块无色，遇水合氯醛试液溶化，菌丝无色或淡棕色，直径4～6μm为茯苓；种皮表皮石细胞淡黄色或淡黄棕色，表面观类多角形，壁较厚，孔沟细密，胞腔含暗棕色物为五味子；花粉粒类圆形，直径24～34μm，外壁有刺，长3～5μm，具3个萌发孔为菊花；纤维成束或散离，壁厚，表面有纵裂纹，两端断裂成帚状或较平截为黄芪；所述的薄层色谱法鉴别壮腰补肾丸处方中是否含有当归成分的方法为：取本品15g，研碎，加乙醚60ml，超声处理20分钟，滤过，滤液挥干，残渣加乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取当归对照药材0.5g，加乙醚20ml，同法制成对照药材溶液；按照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各2～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷‑乙酸乙酯9∶1为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯365nm下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相对应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；所述的薄层色谱法鉴别壮腰补肾丸处方中是否含有红参成分的方法为：取本品7g，研碎，置索氏提取器中，加甲醇100ml，加热回流提取3小时，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣用水30ml溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次20ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次20ml，正丁醇液蒸干，残渣用水30ml溶解，滤过，滤液通过D101型大孔吸附树脂柱，其内径为1.5cm，柱高为12cm，先后用水50ml、40％乙醇30ml和70％乙醇50ml洗脱，收集70％乙醇洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb1对照品，分别加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；按照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取上述四种溶液各2～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇‑乙酸乙酯‑水(4：1：5)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述的薄层色谱法鉴别壮腰补肾丸处方中是否含有续断成分的方法为：取川续断皂苷Ⅵ对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，按照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取鉴别“红参”项下的供试品溶液10μl、川续断皂苷Ⅵ对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷‑甲醇‑水13：7：2，10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述的薄层色谱法鉴别壮腰补肾丸处方中是否含有黄芪成分的方法为：取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；按照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取[鉴别]“红参”项下的供试品溶液10μl、黄芪甲苷对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷‑甲醇‑水(13：7：2)10℃以下放置过夜的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述的薄层色谱法鉴别壮腰补肾丸处方中是否含有五味子成分的方法为：取本品15g，研碎，加环己烷50ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣用加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液，另取五味子甲素对照品，加环己烷制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液，按照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录ⅥB)试验，吸取供试品溶液20μl、五味子甲素对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶GF₂₅₄薄层板上，以石油醚60～90℃‑乙酸乙酯8:1.5为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯254nm下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；所述的以川续断皂苷Ⅵ为对照品，高效液相色谱法检测壮腰补肾丸处方中续断的含量的方法为：⑴色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈‑0.05％磷酸溶液30：70为流动相；检测波长为212nm；理论板数按川续断皂苷Ⅵ峰计算应不低于4000；⑵对照品溶液的制备：取川续断皂苷Ⅵ对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.30mg的溶液，即得；⑶供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，研细，取约5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇100ml，密塞，称定重量，超声处理，功率500W，频率40KHz，40分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续断滤液50ml，蒸干，残渣加水50ml溶解，转移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤2次，每次30ml，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；⑷测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；本品每1g含续断以川续断皂苷Ⅵ(C₄₇H₇₆O₁₈)计，不得少于0.60mg。