[发明专利]一种苹果树苗组织培养繁育方法

摘要

本发明涉及果树繁育技术领域，具体是一种苹果树苗组织培养繁育方法。目的在于提供一种采用组织培养技术，快速繁殖无毒树苗的方法。主要步骤为：(1)外植体选择；(2)外植体脱毒；(3)增值培养；(4)生根培养；(5)移栽；本发明再生植株在遗传上比较稳定，自发变异频率低；植株再生所需的时间短，植株粗壮，适应性强，移栽成活率高。

主权项

一种苹果树苗组织培养繁育方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体选择在春季温度达到15℃以上，挑选种性优良，树体健康，无病虫害，生长健壮发育饱满的嫩枝；(2)外植体脱毒将所选的嫩枝，用清水冲洗干净，在无菌实验室内用75％酒精的酒精消毒30s，再用0.1％的升汞灭菌5‑10分钟，用无菌水冲洗3次，滤纸吸干水分后备用；(3)增值培养将嫩枝切成1.5‑2cm的带腋芽的小段，接到培养基上培养，愈伤组织诱导培养基为MS,长出芽尖2cm时，接种到培养基中增值培养；若所选的外植体为茎尖和叶芽时不用这一步骤，但消毒直接接种到培养基中增值培养；置于25‑30℃恒温和1500‑3000勒克斯(lx)光照强度，每日光照16小时的条件下培养；培养基使用MS培养基，加入生长素NAA0.05mg/L和细胞分离素BA0.5mg/L.分化芽的数目明显增大；(4)生根培养当在三角瓶中增值培养到35‑45天后，观察增值培养苗木的生长情况，将生长健壮的苗木接种到生根培养中生根培养40‑50天，都苗木长至8‑10cm，根大于5cm时，即可移栽；采用含盐低的培养基；置于25‑30℃恒温，光照强度一般要求在2000勒克斯(lx)以上；培养基为：MS+0.34mg/LIBA+0.5mg/LNAA；(5)移栽选择根生长好的幼苗，置于温室大棚中放置1‑2天后，去掉三角瓶塞，放置5‑10天，看到瓶中苗尖生长到瓶口时，即可移栽到苗圃里；温室温度在15‑25℃，湿度保持在在82‑90％；用镊子从瓶中轻轻取出，洗掉附着于根部的培养基，摘去下部叶片，用600倍多菌灵蘸根，栽入基质为河沙或疏松肥沃的沙质壤土的育苗营养钵中，每个营养钵中栽入4个小苗，得到幼苗。