[发明专利]一种蚯蚓血细胞涂片的制作方法

摘要

一种蚯蚓血细胞涂片的制作方法，涉及一种土壤污染生态毒理诊断涂片的制作方法，所述方法包括蚯蚓取血、涂片、染色、观察；将具环带的活体蚯蚓用蒸馏水洗净后，放入培养皿中逐滴加入无水乙醇进行麻醉，然后用手术剪刀在蚯蚓环带下方且靠近环带的腹部将腹血管剪破，血滴在载玻片；并将其置于血滴的前方，向后移动并触及血滴，待血均匀附着于两玻片之间时，自然晾干；将Giemsa染液滴在血膜上，用蒸馏水把染液冲掉，用滤纸吸去多余的水，自然风干后，即可清晰地观察到蚯蚓血细胞内各种细胞的形态。为土壤污染生态毒理诊断提供方法和技术支持。

主权项

一种蚯蚓血细胞涂片的制作方法，其特征在于，所述方法包括以下制作过程：  a、蚯蚓取血：将具环带的活体蚯蚓用蒸馏水洗净后，放入培养皿中逐滴加入无水乙醇进行麻醉，3分钟后，用镊子触碰蚯蚓，待其不作出反应后取出，并用滤纸吸去蚯蚓表面的水分，然后用手术剪刀在蚯蚓环带下方且靠近环带的腹部将腹血管剪破，使血自然流出，勿挤压，取洁净的载玻片，让血滴在离载玻片一端4~5毫米处，勿触及蚯蚓体表；b、涂片：取一块边缘光滑的载玻片做推片，并将其置于血滴的前方，向后移动并触及血滴，待血均匀附着于两玻片之间时，使两玻片呈30~45度的角度，向另一端以一定的速度平稳地推出，角度要保持不变，用力均匀地推出血膜，自然晾干；c、染色：将Giemsa（姬姆萨）染液滴在血膜上，至染液淹没全部血膜，染3分钟后，加等量pH值为7.17的磷酸盐缓冲液与染液混合再染10分钟，用洗耳球轻轻吹动，使染液与缓冲液混合均匀，最后用蒸馏水把染液冲掉，用滤纸吸去多余的水，自然风干后，即可观察；d、显微镜观察：将制好的血涂片放在显微镜上观察，观察时显微镜的倍数由低到高，即可清晰地观察到蚯蚓血细胞内各种细胞的形态。