[发明专利]一种培养结球甘蓝游离小孢子高效获得再生植株的方法

摘要

本发明公开了一种培养结球甘蓝游离小孢子高效获得再生植株的方法。该方法包括(1)胚胎发生，(2)胚萌发和再生植株的获得步骤，其中(1)胚胎发生中将分离出的小孢子置于18±0.5℃培养箱中暗培养，直至有肉眼可见的胚状体产生；将小胚状体转到25±0.5℃、黑暗、50～55rpm摇床上震荡培养，至子叶胚状体形成。应用此方法，可批量获得遗传上纯合的双单倍体植株材料，加速种质资源创新，缩短育种进程。本发明也可在结球甘蓝分子标记育种、突变体筛选及细胞全能性的模式体系等研究领域中推广应用。

主权项

一种培养结球甘蓝游离小孢子获得再生植株的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)胚胎发生1)供体材料选取：选取健康结球甘蓝植株处于单核后期的花蕾为供体花蕾；2)供体材料灭菌；3)小孢子的分离、分装；4)小孢子胚状体的诱导培养：将上一步分离出的小孢子置于18±0.5℃培养箱中暗培养，直至有肉眼可见的胚状体产生；5)子叶胚形成：将小胚状体转到25±0.5℃、黑暗、50～55rpm摇床上震荡培养，至子叶胚状体形成；(2)胚萌发和再生植株的获得1)胚萌发在6000lx光照14h/d、25±0.5℃条件下，将子叶胚转接在胚萌发固体培养基上于培养皿中进行培养，直至胚萌发；2)植株再生2～3周后，转入植株再生固体培养基上，于三角瓶中继续培养1～2周长成幼苗。