[发明专利]一种分子辅助选育草鱼优良品系及选育效果验证的方法

摘要

本发明涉及一种分子辅助选育草鱼优良品系及选育效果验证的方法，包括：选择形态特征好、遗传多样性高的草鱼作为亲本，标记为G₁，注射激素进行催熟，人工授精获得受精卵，进行1龄种鱼培育；同年12月优选G₁中具有生长优势的个体进行抗性实验，存活的个体通过草鱼亲子鉴定的技术找出对应的亲本G₁A，通过对G₁A及其第二年子代g₁A进行验证确定优良品系。使用本发明的草鱼优良品系选育及验证方法，周期短，且可根据不同的养殖环境需要选育出具有相应抗性的优良草鱼品系。

主权项

一种分子辅助选育草鱼优良品系及选育效果验证的方法，包括以下步骤：(1)亲本的选择：选择体型匀称，活泼健康，体重高于平均体重15～20％，并达到性成熟的草鱼作为待选亲本；使用PIT标记对每条待选亲本进行编号，并剪取每条鱼的胸鳍，用12对微卫星对剪下来的胸鳍进行STR分型，对分型结果用Cervus 3.0软件分析这些待选亲本的遗传多样性；对遗传多样性较低的待选亲本进行舍去，有较高遗传多样性的作为亲本，并标记为G₀；所述G₀为待选亲本中遗传多样性较高，用于后续选育实验的基本群体；所述12对微卫星序列如SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.24所示；(2)建立家系：G₀亲本性腺成熟后，一次人工注射激素进行催熟，人工授精获得受精卵；每个家系的受精卵放入一个孵化桶，室温下进行孵化，孵化桶底部进入流水，水从桶上面流出；不同家系受精卵的卵膜破裂4天后，每家系随机取500条混于相同大小池塘饲养，池塘提前进行消毒，提前一周使用畜粪培育生物饵料，饲养过程中随时关注塘内生物饵料的变化情况，及时补充肥料；至夏花阶段，同一家系鱼苗平均分配到两个或两个以上池塘进行1龄种鱼培育，并标记为G₁；所述G₁为G₀第一年子代；(3)优良品系的筛选：同年12月对G₁的生长数据进行统计，并挑选个体较大、活泼健康的G₁进行抗性试验，取存活下来种鱼，并标记为G₁A；取G₁A的部分胸鳍，用无水乙醇保存，草鱼亲子鉴定技术找出G₁A相对应的亲本，并标记为G₀A，G₁中除去G₁A所剩下的群体标记为G₁B，G₀中除去G₀A所剩下的群体标记为G₀B；所述G₁A为G₁中具有生长优势且抗性试验存活的群体；(4)优良品系的验证：第2年分别对G₀A、G₀B两个群体进行人工授精、建立家系、受精卵孵化和1龄种鱼培育(方法同步骤2)，分别标记为g₁A和g₁B；同年12月份分别对g₁A和g₁B两个群体的体长、体宽、体高和体重进行测量，比较g₁A群体的生长优势；g₁A和g₁B各随机取1000尾种鱼进行抗性试验(方法同步骤3)，比较g₁A群体的抗性优势；所述的g₁A、g₁B分别为G₀A和G₀B两群体亲本第二年对应的子后；(5)优良品系的确定：通过对待选亲本的筛选和验证，G₀A群体中同时满足下列两个条件的即可作为兼具生长优势、抗性的优良品系：a.第一年子代与G₁B相比有生长优势和抗性；b.第二年子代与g₁B相比兼具生长优势和抗性。