[发明专利]基于特异性SS-COI引物的棉黑蚜PCR快速检测方法在审
申请号: | 201410697874.7 | 申请日: | 2014-11-19 |
公开(公告)号: | CN104673890A | 公开(公告)日: | 2015-06-03 |
发明(设计)人: | 王冬梅;丁瑞丰;刘建;李海强;李号宾;徐遥;阿克旦;汪飞;李广阔 | 申请(专利权)人: | 新疆农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 无 | 代理人: | 无 |
地址: | 830091 新疆维吾尔自治*** | 国省代码: | 新疆;65 |
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摘要: | 基于特异性SS-COI引物的棉黑蚜PCR快速检测方法,是根据棉黑蚜特有的mtDNA COI序列,设计了一对棉黑蚜特异性的COI引物Aa105-1F和Aa105-1R,该引物只对棉黑蚜具有特异性扩增效果,扩增产物大小为210bp,DNA最低检出浓度为0.192ng/μL。用于植保领域棉黑蚜优势天敌确定及食物链分析,特异性强,准确率高,方便快捷。 | ||
搜索关键词: | 基于 特异性 ss coi 引物 棉黑蚜 pcr 快速 检测 方法 | ||
【主权项】:
一种基于特异性SS‑COI引物的棉黑蚜PCR快速检测方法,其特征在于所述的引物为正向引物Aa105‑1F:5’‑TCCCATAATAATAGGTTGTC‑3’反向引物Aa105‑1R:5’‑TACCTGCTAAATGAAGAGAG‑3’检测步骤为:a.提取样品总DNA;b.以上述步骤提取的DNA为模板,利用权利要求1所述的引物Aa105‑1F和Aa105‑1R进行PCR扩增反应;反应体系以20μL计为:反应条件为:94℃3分钟,94℃30秒,50℃30秒,72℃1分钟,共45个循环;之后72℃10分钟。c.对PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测,如出现大小为210bp的DNA条带,则表明样品为棉黑蚜。
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