[发明专利]一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法

摘要

本发明公开了一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法，该菌株筛选于青岛胶南市大朱山嘴海域，具有较高的氨氮降解能力，生理生化鉴定为红假单胞菌属（Rhodopseudomonas）光合细菌。本发明还公开了降氨氮海水光合细菌的筛选方法。将该菌株用于水产养殖水质改善及生活污水的处理，针对养殖水体或生活污水氨氮含量高的问题，针对性强，应用成本低。

主权项

一种具有降氨氮能力的光合细菌的筛选方法，其特征在于：筛选步骤包括：a、取样：泥水混合样取于青岛胶南市大朱山嘴海域，在低温下带回实验室；b、富集培养基配制：1000 毫升海水加入：5克NH₄Cl、1‑5克CH₃COONa、0.2克MgSO₄·7H₂O、0.2克酵母膏、0.1‑0.3 克蛋白胨，调pH到7.0，121℃灭菌30min；灭菌后加入： 5%的NaHCO₃溶液加20毫升、5%的KH₂PO₄溶液4毫升；c、富集：在无菌条件下接种10%泥水混合样于含有b所述培养基的锥形瓶中，用不透气橡胶塞密封，28℃±1℃静置培养，光照强度36µE·m^‑2·s^‑1，光暗比15h:9h，每天摇动混合一次；培养7天后，取部分富集液按10%转接至新鲜的b培养基中，如上条件中再次富集培养7天；共转接三次获得最终富集液；d、分离纯化培养基配制：1000 毫升海水加入0.1克NH₄Cl，0.3 克CH₃COONa，0.02 克MgSO₄·7H₂O，0.1克酵母膏，18克琼脂，pH值7.0, 121℃灭菌30min；灭菌后加入0.2克 NaHCO₃，0.02 克 K₂HPO₄；e、分离纯化：在无菌环境下，移取1ml富集液于无菌培养皿中，倾注冷却至50‑55℃的d所述培养基，缓慢摇匀，静置凝固；再倾注一层上层培养基进行密封；28℃±1℃静置培养，光照强度36µE·m^‑2·s^‑1，24h光照培养箱中培养，通过观察，挑取红色单菌落，重复在d所述培养基中进行划线分离，获得红假单胞菌属光合细菌。