[发明专利]一种检测过氧化氢的底物预固定布基微流控化学发光方法

摘要

本发明公开了一种检测过氧化氢的底物预固定布基微流控化学发光方法，该方法包括以下步骤：制作布基微流控芯片；将化学发光底液滴加到芯片检测区，然后在2～8℃下避光晾干储存；在芯片进样区滴加样品溶液，若样品中含有H₂O₂，则化学发光反应被触发，经CCD数字成像设备采集获得发光图像，并通过Matlab和Image J软件对图像进行处理。本发明方法的化学发光体系具有稳定性好、检测灵敏度高、动态范围宽等优点，能直接或者间接测定过氧化氢，这在环境监测、食品安全检测、生物化学、临床疾病诊断等领域有极其重要的研究意义。

主权项

一种检测过氧化氢的底物预固定布基微流控化学发光方法，其特征在于包括以下步骤：(1)制作布基微流控芯片设计进样区、检测区和微流控通道的图案，然后制成含有该图案的网纱网板；将布片置于网纱网板下方，并在网纱网板上涂蜡；将布与网纱网板一起加热5‑10秒；将布从网纱网板上取下并冷却至室温，得到布基微流控芯片；所采用的布片是灯芯绒全棉布；(2)化学发光底液预先固定于芯片检测区将鲁米诺溶液、辣根过氧化物酶溶液、对碘苯酚溶液按体积比1:1:1混合，得到化学发光底液；在检测前，将化学发光底液滴加到芯片检测区，然后在2～8℃下避光晾干储存；所述鲁米诺溶液的浓度为3×10^‑3mol/L，辣根过氧化物酶溶液的浓度为0.8mg/mL；(3)进样检测将样品碾碎，用pH值为10的TE缓冲液侵泡10min，静置后所得上清液为样品溶液；在芯片进样区滴加样品溶液，若样品中含有H₂O₂，则化学发光反应被触发，经CCD数字成像设备采集获得发光图像，并通过Matlab和Image J软件对图像进行处理。